DTT在水溶液的半衰期恰好是3－5天，β-ME的更短，只有几十个小时。
普通的SDS-PAGE是还原变性胶，如果loading buffer在4度放置时间较长（>1 week)，用来上样的话，就等于做非还原变性胶。
对于普通的蛋白来讲，分子内二硫键很少或者干脆没有，用陈旧的loading buffer和新的loading buffer（临用前补加还原剂）没有什么区别。
如果你的蛋白巯基较多，而且暴露在分子表面，容易氧化形成分子间二硫键，上述两种胶就有很大区别，有可能看见比正常条带大一到几倍的杂带，
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