医疗器械体外诊断试剂的性能评估

产品性能评估是产品研发、制定产品标准等过程的重要技术支持研究过程，并可能对产品的质量造成一定的影响。

目前国际上对体外诊断试剂的性能评估通常是以美国临床实验室标准化组织（Clinical and Laboratory Standards Institude以下称为CLSI）的相关标准为依据，也是美国FDA推荐采用的评价标准。

美国临床和实验室标准协会

• CLSI是美国【临床实验室标准化协会】的英文缩写，英文名为Clinical and Laboratory Standards Institute。

• CLSI前身是NCCLS【美国临床实验室标准化委员会】，英文名为National committee for clinical laboratory。

• 美国CLSI的抗微生物药物敏感性试验操作方法和判断标准，是国内临床细菌检验遵循的标准。由于制订该项标准需要投入大量的人力、财力和物力，所以大多数国家都还没有能力建立自己的标准而依赖CLSI的方法和标准。CLSI标准每年更新！

• EP系统文件，在实验室工作中常常会应用。所有这些标准和指南对制定我们临床检验的标准型文件会有很大帮助。

性能评价的标准

体外诊断试剂产品性能评估包括检测限、线性范围、可报告范围、准确度（回收实验）、准确度（方法学比较）、精密度、干扰实验、稳定性、参考区间共九个项目。

Trueness / Comparability （准确度）

• EP09-A3, Method Procedure Comparison and Bias Estimation     Using Patient Samples; Approved Guideline—Third Edition

• EP15-A3, User Verification of Percision and Estimation of     Bias; Approved Guideline—Third Edition.

  Precision （精密度）

• EP15-A3, User Verification of Percision and Estimation of     Bias; Approved Guideline—Third Edition.

• EP05-A3, Evaluation of Precision Performance of Quantitative     Measurement Procedures; Approved Guideline—Third Edition.

  Linearity （线性）

     EP06-A, Evaluation of the Linearity ofQuantitative Measurement Procedures: A Statistical Approach; ApprovedGuideline.

Limit of Detection / Quantitation （检测限）

      EP17-A, Protocols for Determination ofLimits of Detection and Limits of Quantitation; Approved Guideline.

Reference Interval （参考区间）

EP28-A3C, Definingand Verifying Reference Intervals in the Clinical Laboratory; ApprovedGuideline—Third Edition.

Qualitative Comparability （定性可比性）

EP12-A2, User Protocol for Evaluation ofQualitative Test Performance; Approved Guideline—Second Edition.

Diagnostic Accuracy （诊断准确性）

       EP12-A2, User Protocol for Evaluationof Qualitative Test Performance; Approved Guideline—Second Edition.

Qualitative Precision （定性精密度）

      EP12-A2, User Protocol for Evaluationof Qualitative Test Performance; Approved Guideline—Second Edition.

检测限（ EP17-A ）

概述

检测限评估资料是评价拟上市产品有效性的重要依据，也是产品注册所需的重要申报资料之一。

空白限值： Limit of  Blank（ LoB ）

检出限值：Limit of  Detection (LoD)

定量限值： Limit of  Quantitation (LoQ)

各种限值之间的关系

• 最低的是空白限值（LOB）：是不含有待测物的可能检测的最大浓度；

• 其次低的是检出限值（LOD）：是可能大于LOB的可被检出的实际浓度；定量限值（LOQ）：能够被可靠检出的最低实际浓度。（目前接受度很低）

• LOB≤LOD ≤ LOQ

• 极限建立顺序：LoB → LoD → LoQ 

建立和验证LoB测量程序

• ISO默认α=β=5%，5%α值相当于空白值分布的95%，作为显著高于空白的检测值的限值，由空白值呈正态分布，此限值相当于：

LoB=μ_B + 1.645σ_B  

注：μ_B即平均值，σ_B即SD                         

• 样本数目：建立需要每个水平≥60个结果，验证每个水平≥20个结果

• 正态分布数据使用公式（1）

LoB=μ_B + 1.645σ_B （1）

注：μ_B即平均值，σ_B即SD

• 偏态分布数据使用公式（2）

LoB=PctB 100-α  （2）

样本选择

• 应尽可能做到，空白与低水平样品为天然样本，或与天然样本具有可替换性。

• 为确保检测具代表性，应对一组样品作检测，而非对单一样品进行检测。鉴于基体差异，最好对5个以上样品作重复检测。

• 作为内源性化合物，空白样品为去除组分的样品，如：用抗体沉淀、酶降解、活性炭吸收等

• 作为低水平内源性化合物，可使用一系列在低范围浓度的样品，若有必要，可配制成有分析物的样品，最好配制一组来自不同个体的系列样品。以综合标准差估计来自样品组的重复检测变异。

建立和验证LoD测量程序

Ø若低水平样品检测结果呈正态分布，其分布的5%（β）百分位数相当于LoB：

LoB=μ_S - 1.645σ_S   注：μ_s即平均值，σ_s即SD