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怎么理解微生物检测中的梯度稀释?

2021.10.15
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xujinping

致力于为分析测试行业奉献终身

  我以口罩、防护服微生物检测指标为例说明。

  一、介绍梯度稀释之前,先理解几个前提条件:

  1.检测结果的单位一般有两种:CFU/g和CUF/件,本文以应用较多的CFU/g为单位讲解;

  2.标准状况下(t=4℃),水的密度=1g/cm3=1g/ml ,低浓度的洗脱液我们在实验计算中近似取1g/ml;

  3.洗脱液的数量的确定考虑2个方面,一是洗脱液具备洗脱效果(例如至少能够浸泡样品);二是洗脱液的重量+样品的重量是10倍、100倍等10的梯度倍数,便于后续梯度稀释及结果统计。

  二、梯度稀释相关计算及说明:

  取10g口罩样品,使用90ml洗脱液洗脱,得到100ml溶液(样品稀释倍数为10倍),取1ml洗脱液到培养皿培养中培养,得到Ncfu,计算:N*100/10=10N(CFU/g)。

  解释一下:

  1. 90ml溶液中包含10g样品,换算成质量即100g溶液中含有10g样品;1ml(即1g)洗脱液中含有的样品重量为0.1g;

  2. 实验得出1ml溶液中含有的CFU数量为N,即0.1g样品中含有的CFU数量为N;

  3. 我们要求的单位是CFU/g,即每克样品中含有多少CFU,所以,0.1g样品中含有的CFU数量*10即是1g样品含有的CFU数量。本例中即是10N。

  从100ml洗脱液中取10ml,加入90ml稀释液二次梯度稀释的计算方法和解释与上述同理。

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