我分析原因是过硫酸胺失效，过硫酸氨最好是先用现配，如果怕麻烦而且跑胶的频率很高的话，那么用完之后ap要放在4℃保存，一周之后必须新配。另外可以适当的增加temed的量，从5μl提高到8μl并无大碍。
如你所说，是不是就是ap失效呢，还有，我强烈建议你复查一边浓缩胶，分离胶各各buffer的组分是否配制有误，特别是pH，另外，现在气温上升，原来冬天配制的溶液的pH和现在可能会相差很多，建议复查，如果pH不对，重新配过。一般情况下，对于pH有要求的溶液，季节更换的时候，基本要重新配过的。原来以贮存液形式存在的溶液，在稀释用作工作液的时候，也要特别注意pH
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