1. 点样 将醋酸纤维薄膜 (2.5cm×8cm) 一条，浸于巴比妥缓冲液，待完全浸透后，取出轻轻夹于滤纸中，吸去多余的溶液，再于薄膜的无光泽面的一端 2.0cm 处，用小玻片蘸取少许血清，垂直印于膜上，待血清渗入薄膜后，以无光泽面向下，两端用数层浸湿的滤纸 ( 或纱布 ) 贴紧，加盖，平衡 2 ～ 3min ，然后通电。
2. 通电 一般电压用 110 ～ 140V ，电流约 0.4 ～ 0.6mA / cm ，时间 45 ～ 60min 。
3. 染色 关闭电源后立即将膜取出，放入染色液中浸染 2 ～ 3min ，然后移入漂洗液中漂洗数次，至蛋白条带清晰，背景无色为止。
4. 定量 取试管 6 支，编号依次为 0 (空白)、 A 、 α1 、 α2 、 β 、 γ ，将电泳图谱亦按 A 、 α1 、 α2 、 β 、 γ 蛋白区带剪开，分别装入相应号码试管中。再在图谱两端无蛋白部位剪一条宽约 α1 带的空白带放入空白管中。各管中加 0.4mol/L NaOH 4ml ，振摇数次，使染料色泽浸出， 30min 后，在 620nm 波长下进行比色，以空白管校正零点，读取清蛋白及 α1 、 α2 、 β 及 γ 球蛋白各管的吸光度。
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