本法系依据蛋白质分子中含有共轭双键的酪氨酸、色氨酸等芳香族氨基酸，其在280nm波长处具最大吸光度，在一定范围内其吸光度大小与蛋白质浓度呈正比。
本法操作简便快速，适用于纯化蛋白质的检测，一般供试品浓度为0.2～2mg/ml。本法准确度较差，干扰物质多。测定法（2）适用于供试品溶液中存在核酸时的蛋白质测定。
对照品溶液与供试品溶液的制备
照各品种项下规定的方法制备。
测定法
（1）取供试品溶液，照紫外-可见分光光度法（通则0401），在280nm的波长处测定吸光度，以吸收系数法或对照品比较法计算供试品中蛋白质的含量。
（2）取供试品溶液，照紫外-可见分光光度法（通则0401），在280nm与260nm的波长处测定吸光度，按下式计算供试品中蛋白质的含量。
蛋白质浓度（mg/ml）=1.45×A280-0.74×A260
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