一、沉淀法
在抽提液中加入适量的中性盐或有机溶剂,使有效成分变为沉淀。经离心除去不溶物,获得的上清液通过透析或凝胶过滤脱盐,即可供纯化使用。
二、吸附法
将干葡聚糖凝胶G25(或吸水棒)加入抽提液中,两者比例为1:5。由于凝胶吸水之故,抽提液的体积可缩小三倍左右,回收蛋白质量约80%.若凝胶(或吸水棒)对有效成分吸附力强或吸水后有效成分的性质有影响时,此法不宜采用。
三、超过滤法
把抽提液装入超过滤装置,在空气或氮气(5.05×105Pa)压力下,使小分子物质(包括水分)通过半透膜(如硝酸纤维素膜),大分子物质留在膜内。
四、透析法
把装抽提液的透析袋埋在吸水力强的聚乙二醇(polyetheylene glycol PEG 分子质量大于20kDa)或甘油中,10ml抽提液可在1h内浓缩到几乎无水的程度。
五、减压蒸馏法
将抽提液装入减压蒸馏器的圆底烧瓶中,在减压真空状态下进行蒸馏。当真空度较高时溶液的沸点可控制在30℃以下。这种方法一般适用于常温下稳定性好的物质。
六、冰冻干燥法
冰冻的抽提液在真空状态下,可以由固体直接变为气体。用此原理进行浓缩,有效成分几乎不会破坏。冻干机主要由低温干燥箱、真空泵和冷冻机构成。在冻干小体积样品时,可以将其置玻璃真空干燥器中进行。具体作法是,把分装至小瓶中的样品冰冻后放入装有五氧化二磷或硅胶吸水剂的真空干燥器中,连续抽真空使其达到浓缩、干燥状态。
上述的浓缩方法(除第五种外),一般都在低温进行。这些方法不仅适用于抽提液的浓缩处理,而且也适用于纯品溶液缩小体积。
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