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何谓正相色谱和反相色谱

2022.1.17
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超级艾蛋木啊

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1、正相色谱基本上可以被看做是液固吸附色谱,其柱填料是吸附剂,其表面上分布有活性吸附位点,溶剂和溶质分子均能被吸附于活性位点上。由于相互作用力有大有小,溶剂分子与溶质分子、溶质分子相互之间又存在竞争吸附,从而造成了在柱内保留时间的差异,使不同物质得到分离。

应用特点:正相色谱一般用来分离中性化合物和离子(或可电离的)化合物,而且以中性样品为主。适于分离样品如下:

①对于反相色谱法很难分离的异构体,可以采用以硅胶为固定相的正相色谱分离分析;

②根据被分离样品极性差别进行族类分离;

③易于水解样品的分离分析;

④分离分析高脂溶性样品,其在极性有机溶剂中溶解度很小;

⑤正相色谱也可以用于异构体分离(包括几何异构体和光学异构体)。

2、流动相极性大于固定相极性的情况,称为反相色谱。非极性键合相色谱可作反相色谱。在现代液相色谱中应用最广泛,现代液相色谱分析工作的70%以上是在非极性键合固定相上进行的。反相介质性能稳定。分离效率高,可分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸等含有非极性基团的各种物质。

应用特点:反相介质性能稳定。分离效率高,可分离蛋白质、肽、氨基酸、核酸、甾类、脂类、脂肪酸、糖类、植物碱等含有非极性基团的各种物质。


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