正相色谱固定相
正相色谱法是最常用的HPLC分离方法之一,固定相一般采用硅胶、氧化铝和极性基团键合的硅胶等。正相色谱中,溶质在柱中固定相上不断进行吸附-解吸循环,根据不同被测物在吸附剂上吸附作用的差异而获得分离。
溶质和固定相间的吸附作用有两类:
①溶质和溶剂分子对吸附剂表面特定位置的竞争作用,这使得溶剂组成的改变往往会引起分离情况发生很大变化
②溶质所带官能团与吸附剂表面相应的活性中心之间的相互作用,这种作用与溶质分子的几何形状有关,当官能团的位置与吸附中心匹配时,作用较强;反之,则作用较弱。
优良的正相色谱固定相应当具有以下基本特性:
①表面具有极性活性基团,即吸附位点
②具有适宜形状,最好呈微米级微球形,且粒径分布均匀
③具多孔性并有高比表面积,以承载较大的样品负荷
④在操作条件下化学性质稳定
⑤具有高机械强度
⑥价格合理且可稳定供应。
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