分析测试百科网

搜索

喜欢作者

微信支付微信支付
×

RNA凝胶电泳试验操作步骤

2022.1.18
头像

zhaoqisun

致力于为分析测试行业奉献终身

  1、将制胶用具用70%乙醇冲洗一遍,晾干备用。

  2、制胶:称取0.5g琼脂糖粉末,加入放有36.5mL的DEPC水(蒸馏水40ml)的锥形瓶中,加热使琼脂糖完全溶解。稍冷(60~70°)却后加入5ml的10x电泳缓冲液、8.5(9)ml的甲醛(+0.5μl溴化乙锭)。然后在胶槽中灌制凝胶,插好梳子,水平放置待凝固后使用。

  3、加样:在一个洁净的小离心管(DEPC处理过的500μl的)中混合以下试剂:电泳缓冲液(10x)2μl、甲醛3.5ml、甲酰胺10ml(μl)、RNA样品3.5(4.5)μl。混匀,置60℃保温10min,冰上速冷。加入3μl的上样缓冲液(染料)混匀,取适量加样于凝胶点样孔内。同时点RNA标准样品。

  4、电泳:打开电泳仪(电泳槽内加入1XMOPS缓冲液),稳压7.5V/cm(ml)电泳。

  5、电泳结束后通过紫外透视仪观察。


互联网
仪器推荐
文章推荐