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关于组胺检测的仪器和试剂介绍

2022.3.21
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coco5517

认真做好每一件喜欢的事,把每一件要做的事都变成喜欢并认真去做的事

  1.1 仪器

  (a)色谱管——200×7mm(内径)聚丙烯管,配有Kontes No.K-422,372Kel-F卡套和约45cm聚四氟乙烯管,以调节与柱相连的出口管高度,控制流速大于3ml/min。或用二通阀 (生物实验室产品)代替管子。

  (b)荧光计——Perkin-Elmer型203或204,带中压汞灯。或带有在350nm激发光和在444nm测量发射光的仪器。

  (c)重换移液管——1和5ml。

  1.2 试剂

  (a)离子交换树脂——Bio-Rad AG/-X8 50—100目。或Dowex 1-X8 50—100目,以约15ml 2M NaOH/g树脂加入烧杯,使其转变为—OH形式,旋摇混合,静置30min。倒出液体并加碱重复操作。用水洗透树脂,糊状物倒进折叠滤纸,再用水洗。每周制备新树脂并浸在水中保存。

  在管(a)底塞上玻璃棉,填入足以形成8cm树脂床层的糊状物,无论何时,都须使树脂层上保留水层。再生树脂,不在填充柱内进行,需要时,可在烧杯里分批再生,每次提取前,用约10ml水洗柱。

  (b)磷酸——1.19M。稀释121.8ml、85%的H3PO4至1L。如用其他浓度磷酸,配1L 1.19M的H3PO4所需体积V=17493/(密度H3PO4×%H3PO4)。标定;吸取5ml H3PO4,以酚酞为指示剂用1.00M NaOH滴定至终点。如需要,可调整浓度。

  (c)邻苯二甲酸二碳基乙醛(OPT)溶液——0.1%。100mg OPT溶于100ml、经玻璃容器蒸馏过的甲醇中,装在棕色瓶中,于冰箱内贮存,每周新配。

  (d)组胺标准溶液——冰箱里贮存。

  ⑴ 贮备液——1mg/ml。无碱性。准确称取约169.1mg组胺·2HCl(98%)于100ml容量瓶中,用0.1M HCl溶解并稀释到刻度,每周新配。

  ⑵ 中间溶液——10μg/ml。吸取1ml贮备液放进100ml容量瓶,用0.1M HCl稀释到刻度,每周新配。

  ⑶ 工作溶液——0.5,1.0和1.5μg/5m1。吸取1,2和3ml中间溶液,分别于100ml容量瓶中,各用0.1M HCl稀释至刻度,每天新配。

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