谷胱甘肽的DTNB比色法测量的介绍

　　原理：DTNB与谷胱甘肽的巯基反应生成黄色的5  -硫代  -2  -硝基苯甲酸，在412 nm波长处有最大吸收峰，而DTNB在400nm以上几乎没有吸收峰。向含有谷胱甘肽的试样中加入少量的DTNB，将反应液在412 nm处测定吸收值，根据吸收值的大小即可求得谷胱甘肽含量 。

　　方法步骤：

　　1、DTNB贮存液配制：将0.01 mol/L的DTNB溶解于0.05 mol/L的磷酸缓冲液（pH7.0）中形成DTNB贮存液  。

　　2、DTNB分析液配制：将DTNB贮存液用0.5 mol/L、pH8.0的Tris  -HCl缓冲液稀释100倍，配成DTNB分析液，避光放置，现配现用。

　　3、操作步骤：取谷胱甘肽标准品溶液或待测样品溶液（0.1 ~ 3.0 mol/L）0.5 mL，加入到1.5 mL浓度为0.15 mol/L的NaOH溶液中，再加入3%的甲醛溶液05mL，在pH8.0、25℃下反应2 min，反应结束后，取反应液0.5 mL加入DTNB分析液，在25℃下反应5 min，于波长412 nm下测定吸收值。根据两者的吸光度，计算差值，代入标准曲线，计算出谷胱甘肽的含量。