配制方法：0.1 g/mL NaOH（甲液）和0.05 g/mL CuSO4（乙液）。甲液配制方法是将50g氢氧化钠和137g酒石酸钾钠溶于500 mL蒸馏水中（贮于带橡皮塞的瓶中）。乙液配制方法是将34.5g结晶硫酸铜溶于500mL水中，加0.5 mL硫酸。混合均匀。
斐林试剂的使用方法：一般将斐林试剂甲液和乙液等体积混合（或在2 mL甲液中滴4～5滴乙液），再将混合后的斐林试剂倒入待测液，水浴加热或直接加热（高中人教版生物必修一中为60℃水浴加热）。如待测液中存在还原糖，则呈现砖红色沉淀；如待测液中不存在还原糖，则仍然呈蓝色。
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