（1）其配方与斐林试剂不一样，其配方为：
①400mL水中加85g柠檬酸钠和50g无水碳酸钠；
②50mL加热的水中加入8.5g无水硫酸铜。制成溶液；
③把溶液倒入柠檬酸钠-碳酸钠溶液中，边加边搅，如产生沉淀可滤去。
（2）其反应原理与斐林试剂略有差别。利用斐林试剂鉴定时，斐林试剂甲和斐林试剂乙直接反应生成Cu(OH)2，Cu(OH)2和可溶性还原糖反应产生砖红色沉淀。而本尼迪特试剂中Cu(OH)2的产生却是这样的：柠檬酸钠和碳酸钠均为强碱弱酸盐，在水中它们均可水解产生OH-，与柠檬酸钠-碳酸钠溶液和CuSO4溶液混合时，Cu2+和OH-结合，生成Cu(OH)2，Cu(OH)2与还原糖中的醛基反应生成砖红色沉淀。
（3）两种试剂的保存方式不同。斐林试剂甲和斐林试剂乙可强烈产生Cu(OH)2，Cu(OH)2很容易沉淀析出，因此斐林试剂一般为现用现配；而本尼迪特试剂的配方中，柠檬酸钠-碳酸钠为一对缓冲物质，产生的OH-数量有限，与CuSO4溶液混合后产生的浓度相对较低，不易析出，因此该试剂可长期保存。
（4）本尼迪特试剂与斐林试剂只适用于还原性糖（如葡萄糖）的鉴定，不用于非还原性糖（如蔗糖）的鉴定。
当然，无论用本尼迪特试剂还是斐林试剂，归根结底都是Cu(OH)2与醛基在沸水浴加热条件下反应而生成砖红色的Cu2O沉淀，两者反应现象一样，这就是二者的相同之处。
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