以光谱学为基础的方法测定血浆蛋白结合率

　　光谱技术也多用于药物血浆蛋白结合常数测定。药物与蛋白质结合生成超分子复合物后，体系的光谱、电化学性质发生改变，从而提供蛋白质浓度或结构方面的信息。常用的光谱法包括紫外-可见吸收光谱法(UV-visible)，荧光光谱法(fluorescence)，红外光谱法(infrared)，元二色谱法(circulardichroism，CD)，旋光法(opticalrotatorydispersion，ORD)以及核磁共振法(NMR)。利用这些方法除了可以测定药物与蛋白质结合率，还可以获得蛋白质和药物的结合位点数、结合位置、作用力类型以及在药物作用下蛋白质结构与功能变化的信息。光谱学技术不适合研究多平衡体系。

　　荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少等优点，因此在研究小分子与蛋白质的相互作用中，荧光光谱法占有重要地位。但该法需要经过大量的计算，较其他方法不简便、不直观。

　　表面等离子体子共振技术是近年来研究很热门的一种新技术，它采用的也是基于光谱技术的一种方法。它的基本原理是当一定特定角度的入射光进入感应片的玻璃棱镜内时，产生的全内反射消失波，与表面等离子体将发生共振，入射光被吸收，导致反射光能量急剧下降，因此反射光谱上出现共振峰(即反射强度最低值)。表面介质折射率的任何微小改变都将使入射角度发生迁移，这种变化被探测器捕获，并转化为相应谱图。利用表面等离子体共振技术研究药物与蛋白的作用情况，具有不需标记及检测快速等优点。但该法所用的仪器都较复杂，价格也较昂贵，难于小型化。迄今，这一技术已在抗体-抗原反应研究、模拟细胞膜与药物作用机理研究、DNA与蛋白质相互作用分析及病毒测定研究等方面取得不少成果，在食品、药物、生物技术及生物制药等领域也越来越受到重视。