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有可能是你的胶点样孔不整齐,就是你做胶的时候胶没有凝固好,你可以试试重新做块胶。PCR拖带产生原因有很多,不知道楼主属于哪一种:1、退火温度较低,可以提高2到3度2、Mg离子浓度一般的PCR在1.5mM就可以了,不知楼主用的多少3、模板浓度较高或者含有其他PCR抑制剂,建议稀释下模板4、延伸时间一般1kb/min,时间太短可能会延伸不完全5、循环数太高也可能引起拖带,考虑平台期,30-35循环应该足够了