根据临床表现和实验室检查母婴ABO血型不合外加一项红细胞致敏的指标(改良直接Coombs试验或抗体释放试验)阳性，即可确诊。

　　1.产前诊断

　　(1)父母亲血型测定：凡既往有不明原因的流产、早产、死胎、死产史或新生儿重症黄疸史的产妇，应警惕有无母婴血型不合。测定母亲和父亲的血型父母血型不合者，应测定母亲的血型抗体。

　　(2)母亲血型抗体测定：怀疑胎儿可能发生溶血病的孕妇应进行抗血型抗体测定第一次测定一般在妊娠第4个月进行这可作为抗体的基础水平。以后每月测定1次，妊娠7～8个月每半个月测定1次第8个月后每周测定1次。若抗体效价上升起伏不定或由高转低者均提示小儿可能受累当抗体滴度达1∶32时宜作羊水检查由于自然界中存在类似AB抗原的物质母亲体内可存在天然的抗A或抗B抗体，通常将ABO溶血病的抗体效价1∶64作为可疑病例。母亲的抗体效价维持不变提示病情稳定。

　　(3)羊水检查：正常的羊水无色透明重症溶血病羊水呈黄绿色，胎儿溶血程度愈重羊水胆红素含量就愈高，故羊水胆红素含量可用来估计病情和决定终止妊娠。羊水在波长450nm处的光密度与羊水中胆红素含量呈一定相关比例，可用分光光度计测定羊水在波长450nm处的光密度代表羊水中胆红素的高低。由于羊水中胆红素的含量随孕周增加而降低，故在不同孕周所测得的光密度的升高数，有不同意义。

　　(4)影像学检查：全身水肿胎儿X线片可见软组织增宽的透明带，四肢弯曲度较差，B超检查显示胎儿肝脾大胸腹腔积液。

　　2.生后诊断

　　(1)临床表现：观察新生儿有无贫血水肿黄疸和肝脾大等溶血症状，若有应考虑新生儿溶血病。

　　(2)实验室检查：对于出生时有水肿、贫血、出生后24h内出现黄疸及母亲为Rh阴性的新生儿应考虑新生儿溶血病，需做血常规、母婴血型血清胆红素和Coombs试验。