1、肉汤稀释(MIC)法
美国疾病控制中心(CDC)推荐用MH肉汤培养基加NaCl至20 g/L浓度,同时加入Ca,Mg离子,将苯唑西林进行倍比稀释,从0.125~16 μg/ml,菌浓度为104/ml,35°C孵育24 h,MIC<2>4 μg/ml为耐药,该法检出率可达95%,但操作较繁琐。
2、琼脂稀释(MIC)法
用含20 g/L NaCl的MH琼脂将苯唑西林倍比稀释为12个不同浓度并浇注平皿。苯唑西林量终浓度为0.125~256 μg/ml。再将菌液(0.5麦氏浊度)点种于含药平皿,35°C孵育24 h。该法适用于大量菌株的MRSA检测,结果容易判断,重复性好,但耗时,费力。
3、琼脂筛选法
这是1997年NCCLS推荐的MRSA的确证试验,即MH培养基加NaCl(40 g/L)加苯唑西林(6 μg/ml),将菌液(0.5麦氏浊度)点种或画线35°C孵育24 h,只要平皿有菌生长,即使一个菌落也是MRSA,该法敏感度为100%,常用作校正其它方法的标准,尤其适用于检测抑菌圈直径处于中介度的金黄色葡萄球菌。