特异性抗内毒素制剂治疗内毒素血症的介绍

　　新的抗内毒素治疗包括中断内毒素合成，结合或中和其活性，防止其与宿主效应细胞相互作用，干扰内毒素介导的信号传导通路等。治疗制剂包括内毒素类似物、抗体、亚单位疫苗、多粘菌素结合柱、重组人蛋白、内毒素合成和细胞内信号传导的小分子抑制剂。

　　(1) 抑制类脂A生物合成

　　噬菌体产生一小段核苷酸序列，起着反义RNA作用，阻断合成LPS的细菌合成酶[10]。按此原理设计的抗G-细菌的药物，其作用与青霉素相似。抑制脱乙酰化酶制剂之一的L-573655，竞争性地抑制80%～90%的LPS合成，4h内快速杀灭大肠杆菌(E. coli)。另一种同类制剂L-161240在E. coli攻击后立即和6小时可保护小鼠免于致死性腹内E. coli感染。3-脱氧-D-甘露-辛酮糖酯胞苷转移酶（CMP-KDO合成酶，可激活KDO掺入到LPS）抑制剂[15]，使类脂A前体聚积，最终杀灭细菌。以该抑制剂预处理可杀死血清中的95%以上的E. coli，增强补体介导的溶菌作用，增加抗菌药物的敏感性10倍，并可降低抗菌药的用量。目前临床进行了人抗内毒素类脂A轻、重链可变区基因的克隆研究，抗体DNA在噬菌体中的重组获得了成功,为下一步的筛选、表达打下了基础[16]。Clone45为IgM类抗多粘菌素B(PMB)单克隆抗体。Clone 45具有模拟类脂A的表面抗原结构,可作为类脂A的替身和LPS的受体拮抗剂,阻断内毒素诱生炎症介质的致病环节,起到抗内毒素休克的作用[17]。

　　(2) 抗内毒素抗体和疫苗制剂

　　分离与各种G-致病菌有高度亲和力的抗体，制成一种嵌合的IgG1单克隆抗体SDZ219-800，对人内毒素血症有治疗作用[12]。可望进入扩大的Ⅲ期临床。抗内毒素核心糖脂单克隆抗体（抗R595单克隆抗体） 具有防治腹腔感染伴MOD时代谢紊乱的代谢调理作用[18]。同样，抗内毒素核心糖脂抗体(抗J5血清)能够明显改善腹腔感染伴MODS的代谢紊乱,对高分解代谢具有显著的调理作用[19]。

　　主动免疫：脱毒LPS疫苗（针对LPS的核心糖脂），采用E. coli J5 galE变异株的脱乙酰化LPS与B型脑膜炎球菌的一种外膜蛋白结合。在实验动物中显示高度的免疫原性和良好的耐受性[20]。产生的多克隆抗体可结合到一些G-杆菌的LPS核心区，保护动物免于致死量内毒素攻击和G-细菌的侵袭性感染。

　　（3）杀菌/通透性增加蛋白

　　杀菌/通透性增加蛋白（bactericidal/permeability-increasing protein ,BPI）是人的一种内源性蛋白，主要存在于嗜中性白细胞的初级颗粒中。其V形结构的分子氨基端与羧基端呈平面对称，许多氨基酸形成一疏水性的囊，容纳LPS的类脂A。BPI与内毒素呈高度亲和性地结合。并有效地清除循环中的内毒素。重组BPI蛋白和23Kda的氨基端部分对内毒素攻击的健康志愿者和G-细菌攻击的动物均有效。BPI能增加G-细菌外膜的通透性而具抗菌性质[21]。但重组BPI血清t1/2短(2～4min)，需要大剂量连续静脉注射给药。目前国内亦有报道BPI对腹腔感染脓毒症大鼠有明显的治疗作用,其机制与其拮抗内毒素活性有关[21]。

　　BPI模拟肽对LPS所致小鼠死亡有明显的保护作用及预防作用,并有一定的量效关系及时效关系。所以，BPI模拟肽,不仅保留了BPI特异性和LPS的特性,而且对LPS攻击小鼠具有更强的保护作用[22]。

　　(4) 重建高密度脂蛋白

　　高密度脂蛋白（high density lipoprotein, HDL）有结合细菌内毒素的高度亲和力，HDL-LPS复合物相当稳定。通过LPS结合蛋白或可溶性CD14的短程穿梭输运到HDL。一旦LPS吸附到HDL微粒上就可以通过肝廓清机制被有效地从循环中清除，故HDL可作为内源性LPS清除系统。以血液供体重建的HDL作Ⅰ期临床实验，注射重组HDL能有效地阻断LPS促炎症细胞因子合成与限制其血液学毒性[23]。

　　多粘菌素B结合柱（PMX-F）：多粘菌素B（polymyxin B， PMX）能中和内毒素，将PMX固定于不溶性纤维上形成PMX-F，用作直接血液灌注（direct haemoperfusion, DHP）的主要成分，既能防止PMX（有中性神经系统及肾毒性）进入全身循环又能结合内毒素。动物实验及Ⅱ期临床研究均有较好效果[24]。

　　(5) LPS拮抗剂

　　E-5531是根据荚膜红细菌（一种无毒的细菌）的类脂A结构而合成的一种内毒素拮抗剂，可抑制其它G-细菌诱导的细胞因子产生。E-5531在细胞表面受体水平上拮抗LPS的活性，其与细胞表面的亲和力大于大肠杆菌的类脂A，该抑制作用是类脂A特异性的诱导细胞激活。E-5531在体内、体外能有效而特异地拮抗LPS诱导的固定的和循环中的细胞释放介质[25]。E-5531与杀菌型的抗菌素合用可抵消后者所致细胞壁裂解后释出的内毒素，用于治疗G-细菌引起的脓毒症有效。

　　(6) 抗CD14抗体

　　CD14在单核巨噬细胞信号传导中有极为重要的作用。由于作为LPS在细胞膜上的结合位点的抗原决定基与可溶性CD14 是同一物质，故研制一种单克隆抗体阻断LPS结合到CD14并传递免疫效应细胞活化的信号[26]。抗CD14抗体用于脓毒性休克的治疗正在进行临床前评价。

　　(7) LPS信号转导抑制剂

　　酪氨酸激酶和丝裂原激活蛋白激酶与LPS细胞信号转导有关。抑制酪氨酸激酶可保护G-细菌性脓毒症时的腹膜炎犬[27]。

　　TYR，一种酪氨酸激酶抑制剂，通过抑制巨噬细胞中介的炎性产物来治疗LPS和G—细胞引起的内毒素性休克[28]。

　　（8）LF-33，一种乳铁传递蛋白起源的缩氨酸，可以中和体内的存在的内毒素，降低LPS浓度，是一种有发展前景的药物[29]。

　　（9）抗内毒素单链抗体

　　构建抗内毒素(LPS)单链抗体基因,并尝试其在E,coli中的表达。目前已经成功地构建了鼠抗LPS ScFv基因,并在E.coliJM109中表达了GST-ScFv融合蛋白[30]。