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1.概述:兼并引物是指代表编码单个氨基酸所有不同碱基可能性的不同序列的混合物。兼并度越低,产物特异性越强。
2.设计引物原则:尽量选择兼并性小的氨基酸,并避免引物3’末端兼并,因为3'端最后3个碱基的退火足以在错误位点起始PCR;次黄嘌呤可以同所有的碱基配对,降低引物的退火温度。