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实时荧光定量PCR的技术原理

2022.10.19
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zhaoqisun

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实时荧光定量PCR:在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。

定量PCR仪是在普通PCR仪的基础上加装了荧光激发装置和荧光检测装置,PCR扩增和检测同时进行,最终结果不需进行电泳检测,所以有效地避免了样品间的交叉污染。常规 PCR技术:对PCR扩增反应的终点产物进行定量和定性分析,无法对起始模板准确定量,无法对扩增反应实时检测。

实时定量PCR技术:利用荧光信号的变化实时检测PCR扩增反应中每一个循环扩增产物量的变化,通过Ct值和标准曲线的分析对起始模板进行定量分析。荧光定量PCR仪就是通过对所记录的参数来计算样品的初始模板量的。


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