第一步：确定载体序列是否正确，启示子、终止子、读码框等； 第二步：确定操作步骤是否正确，如载体是否被污染，是否成功转化入rossetta，抗生素是否正确等； 第三步：核对目的基因序列，与大肠杆菌常用密码子作对比，优化密码子； 第四步：以上三步没有问题时，若还不表达，更换载体； 第四步：更换载体还不表达，选择GST、MBP、SUMO、GB1等助溶标签融合表达。 另外，当目的蛋白太小或太大时可能都不易表达：小肽易被降解；太长例如大的膜蛋白等表达量往往也很难优化。 当然，表达温度以及诱导时间也会对蛋白的可溶表达有一定影响~ 但一般不会导致0和1的差别~祝实验顺利~
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