杆状病毒基因组十分庞大,不能直接对其进行操作插入外源基因,因此需要通过中间转染载体而获得重组杆状病毒。经过十多年来研究者们的不断探索,已构建出用于表达不同基因产物的各种转移载体。这些转移载体的共同特征是[3]:
①在一个基础质粒(如pUC系列)中插入一个多角体蛋白基因启动子(或p10基因启动子);
②启动子下游为一个多克隆位点区,其两侧含有与杆状病毒多角体基因同源的侧翼序列;
③重组转染载体与野生型病毒AcNPV DNA共转染昆虫细胞,通过多角体蛋白基因启动子两端的侧翼同源序列与AcNPV DNA在胞内发生同源重组,使多角体基因被外源基因取代,而将外源基因整合到病毒基因组的相应位置,这样就获得了重组的杆状病毒。