首先，将需测试的样本溶解于水中，加入少量的班氏试剂，摇匀后将此混合物在沸水中加热。反应时间约为3分钟。如果测试样本是还原糖，混合物中会形成红黄色的沉淀物。这是因为还原糖会将硫酸铜中的二价铜离子(Cu2+)还原成一价亚铜离子(Cu+)，并以氧化亚铜(Cu2O)的形式沉淀出来。如果溶液中还原糖含量较低，产生的氧化亚铜便会相应减少，因此试验后可能只会出现绿色、混浊的黄色或橙色沉淀物。
鉴定还原性糖过程
1 取一支试管，注入2mL待测样品
2 向试管内注入2mL本尼迪克试剂
3 将这支试管放进盛有开水的大烧杯中，用酒精灯加热煮沸2分钟左右。
4 观察溶液颜色
结果
非还原性糖如蔗糖，淀粉，纤维素等呈阴性
还原性糖如葡萄糖，果糖，半乳糖等呈阳性
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