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大肠杆菌O157:H7的金标试纸法检测方法介绍

2023.1.16
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coco5517

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  该方法是中华人民共和国卫生部频布的“关于全国肠出血性大肠杆菌O157:H7感染性腹泻应急处理预案”中的指定方法。

  将样品经过特殊的前增菌及增菌后,取120ul的增菌培养液放入试纸夹的样品槽中,样品由于毛细管作用移至反应区,反应区中含有特殊的抗体(E.coliO157:H7抗体)它与胶体金颗粒共轭偶联。如果样品中存在抗原,将同金标抗体结合形成抗原-抗体复合物,沿着硝酸纤维素膜向前移动至含有固定的抗E.coliO157:H7抗体区域(T区),金标免疫的复合物与该区域的抗抗体发生特异性结合形成一条可见的线。其它的样品继续移动到膜的未端,最终进入废物池被遗弃。

  反应区也含有金标结合的一种ZL抗原(颜色指示剂),不管样品中有没有E.coliO157:H7抗原,它都被样品洗脱。金标控制指示剂通过膜移动到阴性控制区与ZL抗体结合形成一条可见的线。无论样品中有没有E.coliO157:H7抗原,控制线都将在控制区(C区)形成,来确保试验正常进行。

  增菌液滴入8-10分钟后,观察试纸C区和T区有无明显的线。在C和T区都有可见的线,则结果为阳性。C区有线、T区无线,则结果为阴性。如C区无线,无论T区有没有线,则实验无效。

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