ph梯度萃取法的步骤：分离碱性强弱不同的游离生物碱，可用pH由高至低的酸性缓冲溶液顺次萃取，使碱性由强到弱的生物碱分别萃取出来。
据不同物质在不同PH下析出沉淀的原理来提纯所需物质。如混合黄酮苷元，由于结构中酚羟基的数目和位置不同，各自所呈酸性强弱不同，使溶于有机相，依次用5％碳酸氢钠，5％碳酸钠、4％氢氧化钠的水溶液萃取而达分离的目的。
含义
溶液酸性、中性或碱性的判断依据是：[H⁺]和[OH⁻]的浓度的相对大小。在任意温度时，溶液[H⁺]>[OH⁻]时呈酸性，[H⁺]=[OH⁻]时呈中性，[H⁺]<[OH⁻]时呈碱性。但是，当溶液中[H⁺]、[OH⁻]较小时，直接用[H⁺]、[OH⁻]的大小关系表示溶液酸碱性强弱就显得很不方便。
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