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怎样鉴定HEP3B细胞

2023.2.28
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目的探讨核转录因子(NF)-κB对肝细胞癌细胞Hep3B中COX-2表达的调控作用.方法以体外合成的NF-κB亚单位p50反义寡聚脱氧核苷酸(AS ODN)处理Hep3B细胞72 h,利用Western blot方法检测AS ODN处理的Hep3B细胞p50和COX-2蛋白表达水平.利用电泳凝胶迁移法测定经AS ODN处理的Hep3B细胞核内NF-κB水平.对照组为p50正义寡聚脱氧核苷酸(SODN)和未经处理的Hep3B细胞.结果(1)Western blot分析显示,与以SODN处理和对照组的Hep3B细胞相比,以AS ODN处理的Hep3B细胞其NF-κB亚单位p50蛋白的水平明显降低,Hep3B细胞核抽提物NF-κB水平也相应减低.(2)以AS ODN处理的Hep3B细胞其COX-2蛋白水平低于以S ODN处理的Hep3B细胞和对照组细胞.结论在肝细胞癌细胞Hep3B中,NF-κB亚单位p50反义寡聚脱氧核苷酸(AS ODN)可抑制NF-κB活性,导致COX-2的表达下调.由此反过来推测,活化的NF-κB对COX-2具有激活和诱导作用,提示COX-2在肝细胞中作用与NF-κB通道有关,在肝细胞癌的形成和以NSAIDs预防性或治疗性用于肝细胞癌时,NF-κB有了新的作用.

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