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qpcr中的荧光强度低跟染料的量有关。曲线不光滑有时跟染料的量相关,可以加大,或者是扩增产物太少了。扩增效率差有引物、试剂和pcr条件的原因。可以做温度梯度摸索实验,寻找最佳退火温度(扩增子的影响),还可以增加mg离子的浓度,如果其他条件都好了,还不行,那就是引物的原因。实时荧光定量PCR(QuantitativeReal-timePCR)是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。