人参总皂苷的含量测定

　　人参总皂苷照 高效液相色谱法（附录 Ⅵ D ）测定对照品溶液的制备精密称取人参皂苷 Re 对照品 5mg ，置 5ml 量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。供试品溶液的制备精密称取本品约 50mg ，置 25ml 量瓶中，加甲醇适量使溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。标准曲线的制备精密吸取对照品溶液 20µl 、 40µl 、 80µl 、 120µl 、 160µl 、 200µl ，分别置于具塞试管中，低温挥去溶剂，加入 1% 香草醛高氯酸试液 0.5ml ，置 60 ℃ 恒温水浴上充分混匀后加热 15 分钟，立即用冰水冷却 2 分钟，加入 77% 硫酸溶液 5ml ，摇匀，以试剂作空白，消除气泡后照紫外  -可见分光光度法（附录 Ⅴ A ）检测，在 540nm 的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，以浓度为横坐标，绘制标准曲线。测定法精密吸取供试品溶液 50µl ，照标准曲线的制备项下的方法，自“置于具塞试管中”起操作，依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液的含量，计算结果乘以 0.84 即得。本品按干燥品计，含人参总皂苷以人参皂苷 Re （ C 48 H 82 O 18 ）计，应为 65% ～ 85% 。人参皂苷 Rg 1 、 Re 、 Rd 照高效液相色谱法（附录 Ⅵ D ）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相 A ，以 0.1% 磷酸溶液为流动相 B ，以下表进行梯度洗脱；检测波长为 203nm 。理论板数按人参皂苷 Re 峰计算应不低于 3000 。时间（分钟）流动相 A （%）流动相 B （%） 0 ～ 30 19 81 30 ～ 35 19→24 81→76 35 ～ 60 24→40 76→60 对照品溶液的制备精密称取人参皂苷 Rg 1 与人参皂苷 Re 和人参皂苷 Rd 对照品适量，加甲醇制成 1ml 中含人参皂苷 Rg 1 0.30mg ，人参皂苷 Re0.50mg 和人参皂苷 Rd 0.20mg 的混合溶液。供试品溶液的制备精密称取本品约 30mg ，置 10ml 量瓶中，加甲醇超声（功率 250W ，频率 50kHz ）溶解并稀释至刻度，摇匀，即得。

　　测定法分别精密吸取上述对照品溶液 20μl 与供试品溶液 5 ～ 20μl ，注入液相色谱仪，测定，即得。本品按干燥品计算，含人参皂苷 Rg 1 （ C 42 H 72 O 14 ），人参皂苷 Re （ C 48 H 82 O 18 ），人参皂苷 Rd （ C 48 H 82 O 18 ）的总量应为 15% ～ 25% 。