磷酸腺嘌呤的检查方法

检查

有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液取本品适量,精密称定,加流动相A溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.4mg的溶液。对照溶液精密量取供试品溶液适量,用流动相A定量稀释制成每1ml中约含0.4gg的溶液系统适用性溶液取磷酸腺嘌呤约10ng,置25ml量瓶中,加30%过氧化氢溶液1ml,放置12小时,用水稀释至刻度,摇匀。灵敏度溶液精密量取对照溶液2ml,置10ml量瓶中用流动相A稀释至刻度,摇匀色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.0lmol/L醋酸铵溶液(用冰醋酸调节pH值至5.0)作为流动相A;以甲醇作为流动相B;按下表进行梯度洗脱;检测波长为262nm;进样体积10l时间(分钟)流动相A(%)流动相B(%)15系统适用性要求系统适用性溶液色谱图中,调节流动相B的比例,使腺嘌呤主峰的保留时间在15分钟内出峰,腺嘌呤峰与其后相邻杂质峰之间的分离度应符合规定。灵敏度溶液色谱图中,主成分峰高的信噪比应大于10测定法精密量取供试品溶液与对照溶液,分别注人液相色谱仪,记录色谱图。限度供试品溶液的色谱图中如有杂质峰,单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积(0.1%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的2倍(0.2%)。小于灵敏度溶液主峰面积的色谱峰忽略不计(0.02%)。含氮量取本品约90mg,精密称定,照氮测定法(通则0704第一法)测定,按干燥品计,含氮量应为29.4%~30.3%有机氯取本品约20mg,照氧瓶燃烧法(通则0703)进行有机破坏,用1mol/L氢氧化钠溶液2ml与水10ml为吸收液,俟生成的烟雾完全吸入吸收液后,用水13ml淋洗瓶壁、瓶塞及铂丝,洗液与吸收液合并,照氯化物检查法(通则0801)检查,与标准氯化钠溶液5.0m1制成的对照液比较,不得更浓(0.25%)硫酸盐取本品0.25g,依法检查(通则0802),与标准硫酸钾溶液0.5ml制成的对照液比较,不得更浓(0.02%)。干燥失重取本品,在105℃千燥至恒重,减失重量不得过0.5%(通则0831)。重金属取本品0.5g,加水23m1与醋酸盐缓冲溶液(pH3.5)2ml,加热使溶解,放冷,依法检查(通则0821第一法),含重金属不得过百万分之三十。