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病毒包装的原理

2024.2.29
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质粒 DNA 和其他包装质粒共转染细胞(293T 细胞)产生病毒,即为病毒包装。

293T 细胞是由 293 细胞派生, 表达 SV40 大 T 抗原的人肾上皮细胞系, 被广泛应用于瞬时转染以过表达各种目标蛋白, 或是用以包装病毒。

病毒包装的原理(以慢病毒包装为例)

质粒 DNA 为能转录出慢病毒遗传物质(RNA),但不能翻译出慢病毒的外壳及蛋白成

分的载体质粒,其同时连有目的基因和报告基因,psPAX2 为能表达慢病毒外壳的质粒,其

表达产物可通过粘附机制更易穿过细胞膜, pMD2.G 为慢病毒的膜蛋白质粒,通过

lipofectamine2000 进行三质粒共转到靶细胞基因组中,宿主基因组在表达时,随宿主基

因转录出的目的基因 RNA 与 psPAX2、pMD2.G 基因翻译出的蛋白组装为慢病毒。

病毒进入细胞后,其遗传物质 RNA 反转录出 DNA,该基因再整合到靶细胞的基因组中,完成转染

过程,因为质粒 DNA 只能转录出病毒 RNA 和表达目的基因却不能表达出病毒的外壳和膜

蛋白成分,因此其不能像普通的病毒一样在宿主细胞能反复增殖,故对宿主细胞是无害的并

且高效的将目的基因转然到靶细胞基因组中。


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