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克隆化酵母DNA的操作实验

2020.8.18
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王辉

致力于为分析测试行业奉献终身

实验材料 酵母

实验步骤

  1.   将待研究的基因亚克隆到YIP质粒。

2.  用限制性内切酶在克隆化基因内部切开,使质粒线性化。

3.  用1~10 μg DNA加上担体DNA转化适合的菌株,通过质粒上带的标记进行选择,在选择培养基上纯化几个转化子,制备DNA,应用Southern 杂交确证整合是否发生在所期望的位点,并且测定是否发生了多重整合。

注意事项

如果没有单限制性酶切位点,可以在此区域用一个或多个酶消化产生一个缺口,但缺口两边须具有足够的同源序列。

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