概述基因沉寂的实现工具

　　Sigma-Aldrich公司近日在全球推出MISSION&reg； esiRNA，一种基因特异的siRNA库，它为哺乳动物细胞中的RNAi筛选提供了一种强有力的方法。与传统的合成siRNA不同，esiRNA集合了数百个针对单个基因靶点的siRNA。这种新工具能避免鉴定有效siRNA的反复试验过程，迅速实现基因沉默，并确保脱靶效应最低。

　　此项技术与传统的单个siRNA介导的基因knockdown相比，优势相当明显。以前，我们需要反复试验，来鉴定出最有效的siRNA，现在有了这个siRNA的“超级库”，这一步都省了。此外，esiRNA还能确保最低的脱靶效应。esiRNA是由德国马普学会细胞生物学和遗传学（MPI-CBG）开发的。

　　MPI-CBG的课题组组长Frank Buchholz开创了esiRNA技术在RNAi筛选中的应用。他表示：“我们很高兴能与Sigma-Aldrich合作，让整个学术界都能享有esiRNA技术。10年前，esiRNA在美国旧金山加州大学的Mike Bishop实验室中发明。自此，它就成为我的研究重点。Sigma-Aldrich在RNAi方面的丰富经验和产品线是我们生产高效特异esiRNA的完美补充。”

　　哈佛大学医学院正在运用esiRNA来协助鉴定促使HIV增殖的人类基因。临床研究员Abraham Brass博士认为MISSION esiRNA的初步试验结果表明多个基因都能被非常有效地knockdown。哈佛医学院很快将会把此项技术整合到多项研究中。

　　esiRNA是由核酸内切酶制备的。首先用特异的引物扩增最佳的靶区域。序列经过验证后，利用RNA聚合酶产生300-600 bp基因特异的双链RNA，随后用核酸内切酶切割产生短的dsRNA。这些类似siRNA的分子经过纯化，就形成了siRNA库，它们靶定了单个基因的不同序列。