GE小编
昨日国足刚完成对韩国的世界杯亚洲区预选赛，虽然2-3不敌韩国，但三分钟内连射两球的不抛弃不放弃精神，感染了一票观众！
在蛋白纯化试验中，His标签蛋白纯化填料就好比足球比赛的射球点，是能否达到有效的蛋白纯化的关键球！今天，小编就来教会大家如何正确使用不同种类的His标签蛋白纯化填料进“球”。
His标签蛋白纯化填料
的十八般武艺
HisTrap excel & Ni Sepharose excel
抢点倒地凌空射门球
这是小编强烈推荐的一款新填料。它打破了常规镍填料的局限，能够耐受100mM的EDTA，没错，真的是100mM，不是10mM这么简单，可以说，对于excel，EDTA已经没有任何话语权了。再也不用担心缓冲液的不兼容而费力地更换缓冲液了。你以为仅仅这样而已么，那就太小看它了。1M的NaOH也不在话下，从此彻底清洗镍填料再也无需先脱镍，直接使用NaOH就可以彻底清洗，避免交叉污染，还不用考虑自己挂镍后载量的变化。可谓省心省力省时间。
HisTrap FF & Ni Sepharose 6 FF
鱼跃侧摆头顶射门球
这是一款最常规的填料，有着高载量、良好的兼容性、流速快、易放大等特点，是组氨酸标签手动纯化的常规选择，是一款经济实惠的入门基本款。
HisTrap FF crude
剪绞侧踢倒钩射门球
crude预装柱与常用的Ni Sepharose 6 FF是一致的，它的特点在于裂解液无需离心过滤，即可直接上样，能够减少样品处理的时间。如果样品容易降解，或者柱子特别容易堵，可以考虑这款预装柱。当然，它也可以作为常规的His标签预装柱使用。
HisTrap HP & Ni Sepharose HP
凌空侧体剪式射门球
HP与FF的区别在于它的粒径更细，FF的平均粒径为90μm，而HP只有34μm。因此，使用HP的填料，分辨率更高，峰展宽更窄，样品的纯度、浓度也会相对地提高，特别适合有AKTA设备的用户。
HiTrap TALON & TALON Superflow
抢点争顶头球射门球
提到His标签纯化填料，脑海里默默地浮现出蓝色，这可是惯性思维的表现。其实不只是镍离子，还有其它不同的金属离子也是可以选择的。TALON就是偶联的钴离子，因为离子半径比镍要大，其结合力相对会弱一些，使得一些结合力较弱的杂蛋白无法结合。因此，如果希望通过一步法获得更好的纯度，可以选择这款可爱的粉红色填料。
Hitrap IMAC HP / FF & IMAC Sepharose 6 FF
侧身凌空抽射门球
其实这就是未耦合金属离子的填料，只是它的耦合方式经过优化，与早期的Chelating填料相比，有着更强的结合能力，和更稳定的化学性质。在科学家的不断改进下，摸索出的新工艺，在高载量的同时，金属离子也不易脱落，大大提高了金属亲和填料的性能。
Hitrap Chelating HP & Chelating Sepharose FF
抢点铲球射门球
这是最早期的一款填料，采用IDA的偶联方式，有着高载量的特点，价格非常实惠。有时候，不同的结合力，会带来不同的选择性。
GE小编
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