在日常色谱分析实验过程中,
您有没有遇到过结构相似化合物的分离难题?
通常是如何解决的呢?
今天小编就给大家介绍一件神秘武器
——Ascentis® Express F5色谱柱。
Ascentis® Express F5 U/HPLC色谱柱填充稳定的五氟苯基丙基反相固定相,由于存在负电性的氟,其苯环缺电子,除π-π和温和的立体作用力外,五氟苯基固定相还可通过极性相互作用对化合物进行保留。具备极性和非极性特性,五氟苯基固定相表现出双模式保留行为,依据流动相中乙腈含量的函数得到一种“U 形” 保留行为,即保留会在低和高浓度乙腈(反相和HILIC 保留模式)下均有所提高。Ascentis® Express F5适用于碱性、酸性或中性化合物分析,并可提供相对C18的正交选择性。
Ascentis® Express F5参数
硅胶:
B型(高纯度硅胶)
填料类型:
表面多孔颗粒(SPP)
固定相:
五氟苯基丙基硅烷
粒径:
2.0 µm / 2.7 µm / 5.0 µm
孔径:
90 Å
碳载量:
5.3% / 5.5% / 3.9%
表面积:
120 m²/g / 135 m²/g / 90 m²/g
pH范围:
2 - 9
低pH时的最高温度:
60 °C
高pH时的最高温度:
40 °C
封端:
是
相比于C18,F5 表现出更强的碱性化合物保留和更低疏水性化合物保留
适用于正相、HILIC 和纯水相应用
固定相稳定,柱流失低
结构接近的化合物的分析
氢化可的松和泼尼松龙结构相似,仅有一个双键之差。虽然它们溶解度接近,形状差异却十分显著。下面这个应用实例展示了使用C18和F5固定相对它们(包括泼尼松内标(IS))进行分离的结果对比。显然,由于增强的立体选择性,五氟苯基相可以对这些结构类似的化合物进行分离。
色谱条件
色谱柱:
Ascentis® Express F5,10 cm x 4.6 mm, 2.7 µm(53590-U)
Ascentis® Express C18, 10 cm x 4.6 mm, 2.7 μm (53827-U)
流动相:
[A] 水;[B] 甲醇
流动相比例:
A:B 50:50, v/v
流速:
0.8 mL/min
温度:
35 °C
系统压力:
2400 psi
检测器:
紫外 波长240 nm
进样量:
5 μL
样品:
溶于10%甲醇水溶液,每种10 μg/mL
在反相和HILIC模式下
对司来吉兰和苯丙胺的分离
HILIC是多模式保留机理,可提供与反相机理正交的选择性,Ascentis® Express F5 对司来吉兰和苯丙胺的色谱分离结果可证明此点。司来吉兰在HILIC条件下会最后发生洗脱,但在反相条件下则会首先发生洗脱。因此,司来吉兰主要通过RP分配作用进行保留,而苯丙胺主要通过离子交换保留。
色谱条件
色谱柱:
Ascentis® Express F5, 10 cm x 4.6 mm I.D., 2.7 µm (53590-U)
流动相:
[A] 10 mM乙酸铵,pH 4.0,含乙酸;[B] 乙腈;(20:80, A:B - HILIC),(40:60,A:B - 反相)
流速:
0.6 mL/min
压力:
260 bar (2300 psi)
温度:
35 °C
检测器:
MS ESI (+), SIR m/z 136, 150, 188
进样体积:
2 µL
样品:
溶于甲醇,10 µg/mL
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