细胞治疗生产流程中，单核细胞的分离在DC疫苗制备和CAR-T细胞制备中都非常重要。在DC疫苗制备过程中，单核细胞是DC的前体细胞，其分离纯度的高低直接影响到DC疫苗的质量。Rotea 通过逆流离心的物理方法，可以从单采血中分离出纯度较高的单核细胞组分，进而获得高质量的DC疫苗。CAR-T细胞制备过程中，针对单核细胞占比高的病人来源单采血样品，可用Rotea去除单核细胞，消除单核细胞对后续T细胞分选和扩增的影响，从而获得高纯度的CAR-T细胞产品。
Rotea逆流离心细胞处理系统原理
依靠两个方向相反的力（离心力和液体流动的流动力） ，按细胞大小选择性地分离不同细胞组分。
典型的单采血细胞组分分布图
其中淋巴细胞直径7-13µm，单核细胞直径11-17µm。对于在直径大小上重叠的部分细胞（如较大的淋巴细胞和较小的单核细胞），单核细胞的回收率可根据对单核细胞纯度的要求来折衷调整。
Rotea工作原理
血细胞大小分布
Rotea 分离单核细胞方法概述
以DC疫苗制备为例，利用Rotea 的逆流离心原理可用物理方法从单采血中分离纯度较高的单核细胞组分（纯度>65%)。相比于其它分离方法，物理法对细胞本身的干扰要小得多且更具有成本优势。Rotea 分离单核细胞有两种方法：一步法和两步法，两种方法流程、优势及数据概括如下：
一步法
快速：直接从单采血中分离出单核细胞，无需先得到PBMC再对PBMC进行淋巴和单核的分离。
不需要使用Ficoll：利用红细胞、淋巴与单核细胞在细胞直径大小上有大于4um 的区别，直接用洗涤液对红细胞和淋巴细胞进行淘析即可得单核细胞。
单核细胞纯度更高，淋巴细胞回收率更高。
两步法
红细胞、粒细胞残留少：先用Ficoll对单采血中的大部分红细胞和粒细胞进行去除，得到单采血中的白细胞组分（或称之为PBMC）。
然后和一步法一样用洗涤液对淋巴细胞进行淘析获得高占比的单核细胞组分。
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