来源：客户投稿
什么是维生素C，它有什么作用？
维生素C，也称为抗坏血酸，是一种水溶性营养素，存在于某些食物中。在体内，它作为一种抗氧化剂，有助于保护细胞免受自由基造成的损害。自由基是当我们的身体将我们吃的食物转化为能量时形成的化合物。人们还会暴露于环境中的自由基，包括香烟烟雾、空气污染和来自太阳的紫外线。
目前如何检测食品中维生素C的含量？
目前现行有效的国标GB 5009.86-2016 食品安全国家标准《食品中抗坏血酸的测定》有三种方法进行检测，包括第一法：高效液相色谱法、第二法：荧光法、第三法：2,6-二氯靛酚滴定法。其中高效液相法为最常用方法。
国标方法维生素C图谱
仪器参考条件
色谱柱：C18柱，柱长250mm，内径4.6mm，粒径 5μm，或同等性能的色谱柱
检测器：二极管阵列检测器或紫外检测器
检测波长：245nm
流速：0.7 mL/min
柱温：25 ℃
进样体积：20μL
流动相：A相：6.8g磷酸二氢钾和0.91g十六烷基三甲 基溴化铵，用水溶解并定容至1L（用磷酸调pH至2.5~2.8）
B相：100%甲醇
按 A∶B=98∶2混合，过0.45μm 滤膜，超声脱气
色谱图：
Y公司C18 250*4.6mm 5μm
结论：由于标准中流动相水相含量高达98%，故不能选用普通C18进行实验，只能选用耐水性C18柱子（具体能否进高水相可咨询色谱柱厂家）。国标5009.86中维生素C分为L型、D型两种异构体，两者间出峰时间相近，根据上述图谱随着针数的增加，保留时间一直往后推，且浓度越高分离度越来越低。查询文献可知，十六烷基三甲基溴化铵为离子对试剂对于色谱柱损伤较大，并且水相太高对于柱子填料的选择性影响较大，增加有机比例两者分离度变差，故本公司对流动相和色谱柱进行摸索改进。
客户改进方法后维生素C图谱
色谱柱：MicroPulite®️ Perfect T3
4.6*150mm 3.0μm（货号：PFTT3-154630）
检测器：245nm
流速：0.6 mL/min
柱温：25 ℃
进样体积：20μL
流动相：0.1%磷酸水溶液:甲醇=99:1
色谱图：
微纯生物科技MicroPulite® Perfect T3 4.6*150mm 3.0μm
结论：
1. 由于维生素C在酸性条件下稳定性较好，故流动相考虑使用0.1%磷酸水溶液代替低pH缓冲盐溶液，该方法在不使用离子对试剂下，保留时间与分离度稳定性好，连续进样多针后保留时间RSD在1%内分离度维持在2.7~2.8之间，方法简单稳定可靠。
2. 维生素C为水溶性营养物，在高水相酸性条件要求苛刻，故选用适应范围较广、耐水性高的微纯生物科技MicroPulite®️ Perfect T3色谱柱作为本实验色谱柱。同时对比A公司SB-C18、Y公司AQ-C18，其选择性最好。
微纯生物科技MicroPulite® Perfect T3采用三键键合的工艺，纯水体系下，键合相不易发生柱流失，有最佳稳定性。
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