治疗药物监测（TDM），是为保障患者用药安全的一种药学技术服务，是精准医疗的一种有效实现形式。在个体化用药逐渐兴起的时候，治疗药物监测具有重要意义，它为指导临床用药提供依据，从而达到安全、合理、有效、经济的用药目的。
在国外，大分子抗体药物的治疗药物监测是一个新热点，其中包括肿瘤坏死因子α拮抗剂英夫利昔单抗、阿达木单抗和依那西普等。
肿瘤坏死因子α是一种主要由巨噬细胞和单核细胞产生的促炎细胞因子，参与正常炎症反应和免疫反应。在许多病理状态下，肿瘤坏死因子α的产生会增多，如败血症、恶性肿瘤、心脏衰竭和慢性炎性疾病，在重症类风湿关节炎患者的血液及关节中都可发现肿瘤坏死因子增多。
肿瘤坏死因子α拮抗剂可以通过与肿瘤坏死因子α的特异性结合而阻断肿瘤坏死因子α的生物活性，从而达到控制炎症、缓解病情的目的。目前常用的肿瘤坏死因子α拮抗剂有英夫利昔单抗、阿达木单抗和依那西普，应用在克罗恩病、银屑病和类风湿性关节炎等炎症性疾病的治疗。
那么，我们来看一下用TDM监测肿瘤坏死因子α拮抗剂过程中存在的问题和解决方案。
用药过程中存在的问题
研究表明，在使用英夫利昔单抗治疗中度 vs重度溃疡性结肠炎（UC）患者，克罗恩病（CD）vs UC患者时，患者的药代动力学存在差异。与给予同样处理的中度UC和CD患者相比，更大比例的严重UC患者血清中检测不到最低浓度的英夫利昔。英夫利昔上午波谷浓度检测不到，会增加UC患者结肠切除术的风险，二者间具有显著的相关性。低浓度的英夫利昔检测不到或检测不准，是临床治疗药物监测面临的一个问题。
问题的解决方案
传统的生物治疗药物是通过免疫法(如ELISA)进行定量的，但这些方法可能存在交叉反应性和缺乏特异性。然而，当免疫亲和捕获方法与高特异性检测方法(如LC-MS/MS)相结合时，方法的灵敏度和选择性可以大大提高。
现在，让我们一起看看沃特世的解决方案吧！
首先，血清样品经过免疫亲和纯化，使用ProteinWorks eXpress Digest Kit酶解，100 μL亲和纯化样品使用120 μL ProteinWorks 酶解缓冲液稀释。然后按照试剂盒随附的5步方法酶解2小时，样品就可以上样LC-MS进行检测。
图1.免疫亲和纯化样品
下图为使用ACQUITY UPLC Peptide BEH C18，1.7μm，2.1×150 mm色谱柱检测人血清中英夫利昔单抗、阿达木单抗、依那西普及其对应内标的结果，以及仅仅处理2.5 μL人血清英夫利昔单抗QC样品的检测结果。
图2.使用ACQUITY UPLC Peptide BEH C18，1.7μm，2.1×150 mm色谱柱检测人血清中英夫利昔单抗、阿达木单抗、依那西普及其对应内标的结果
图3.处理2.5 μL人血清英夫利昔单抗QC样品的检测结果
沃特世解决方案的优势
选择性免疫亲和富集和标准化、基于试剂盒的蛋白酶解方法，结合快速UPLC分析和高灵敏度质谱可实现：血清取用量少（≤10 μL）；英夫利昔单抗、阿达木单抗和依那西普定量下限低（10-50ng/mL）；所有标准品和QC样品重现性%RSDs＜15%，且线性良好。
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