摘要
本文建立了天麻特征图谱的 HPLC 方法。参照 2020 版《中国药典》天麻特征图谱色谱条件，采用色谱柱 SHIMSEN Ankylo C18（4.6×250 mm，5 μm）和 Shim-pack VP-ODS（4.6×250 mm，5 μm），对对照药材参照物溶液、对照品参照物溶液和供试品溶液进行分析，结果显示规定的 6 个特征峰在供试品溶液中均有呈现，且与对照药材参照物溶液特征图谱中的 6 个特征峰相对应，其中峰 1、峰 2 与天麻素对照品和对羟基苯甲醇对照品参照物保留时间相一致，且重现性良好。此方法可为天麻特征图谱分析提供参考。
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实验部分
1.1 实验仪器与耗材
Shimadzu LC-20AD 高效液相色谱仪；
色谱柱：
SHIMSEN Ankylo C18
（5 μm，4.6×250 mm；
P/N：380-01200-01；S/N：6AZ06022）
Shim-pack VP-ODS
（5 μm，4.6×250 mm；
P/N：228-34937-92；S/N：9082978）
SHIMSEN Disc针式过滤器
（P/N：380-00341）；
LC/MS认证样品瓶LabTotal Vial
（P/N：227-34001-01）；
SHIMSEN Pipet 移液枪：
SHIMSEN Pipet PMII-100、SHIMSEN Pipet PMII-1000。
1.2 对照品溶液的制备
取天麻对照药材约 0.5 g，置具塞锥形瓶中，加入 50%甲醇 25 mL，超声处理（功率 500W，频率 40 kHz）30 分钟，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，作为对照药材参照物溶液。另取天麻素对照品、对羟基苯甲醇对照品适量，精密称定，加乙腈-水（3：97）混合溶液制成每 1 mL 含天麻素 50 μg、对羟基苯甲醇 25 μg 的混合溶液，作为对照品参照物溶液。
1.3 供试品溶液的制备
取本品粉末（过四号筛）约 0.5 g，照对照药材参照物溶液制备方法同法制成供试品溶液。
1.4分析条件及实验结果
1.4.1分析条件
色谱柱：SHIMSEN Ankylo C18
（5 μm，4.6×250 mm；
P/N：380-01200-01；S/N：6AZ06022）
柱温：30℃
检测波长：220 nm
流速：0.8mL/min
进样量：3 µL
流动相：A：乙腈 B：0.1%磷酸水
梯度程序如下：
实验结果
按照上述色谱条件（1.4.2）进行采集，对照品参照物溶液、对照药材参照物溶液和供试品溶液色谱图如下：
对照品参照物溶液：
（左右滑动查看完整内容）
对照药材参照物溶液：
（左右滑动查看完整内容）
供试品溶液：
（左右滑动查看完整内容）
重现性
对照品参照物溶液重现性
供试品溶液重现性
对照药材参照物溶液重现性
1.4.2分析条件
色谱柱：Shim-pack VP-ODS
（5 μm，4.6×250 mm；
P/N：228-34937-92；S/N：9082978）；
柱温：30℃
检测波长：220 nm
流速：0.8mL/min
进样量：3 µL
流动相：A：乙腈 B：0.1%磷酸水
梯度程序如下：
实验结果
按照上述色谱条件（1.4.2）进行采集，对照品参照物溶液、对照药材参照物溶液和供试品溶液，色谱图如下：
对照品参照物溶液：
（左右滑动查看完整内容）
对照药材参照物溶液：
（左右滑动查看完整内容）
供试品溶液：
（左右滑动查看完整内容）
重现性
对照品参照物溶液重现性
供试品溶液重现性
对照药材参照物溶液重现性
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结论
综上，本文建立了天麻特征图谱的 HPLC 方法。参照 2020 版《中国药典》天麻特征图谱色谱条件，采用色谱柱 SHIMSEN Ankylo C18（4.6×250 mm，5 μm）和 Shim-pack VP-ODS（4.6×250 mm，5 μm），对对照药材参照物溶液、对照品参照物溶液和供试品溶液进行分析，结果显示规定的 6 个特征峰在供试品溶液中均有呈现，且与对照药材参照物溶液特征图谱中的 6 个特征峰相对应，其中峰 1、峰 2 与天麻素对照品和对羟基苯甲醇对照品参照物保留时间相一致，且重现性良好。此方法可为天麻特征图谱分析提供参考。
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