Pribolab“双柱" 净化技术方案，助力复杂食品基质黄曲霉毒素检测监管（参考GB5009.22-2016 ）

Pribolab普瑞邦生物

2021.1.27

作者普瑞邦

TA的动态

我们吃的美食，比如麻辣烫、火锅、麻辣小龙虾当中，必不可少的是辣椒、花椒、麻椒、香辛料等调味料。这些调料给我们带来舌尖上的盛宴的同时，安全问题也成为关键。其中黄曲霉毒素是这些调料当中最常检测的毒素。

Pribolab针对辣椒、花椒、麻椒、香辛料等复杂基质，根据【GB 5009.22-2016 食品安全国家标准食品中黄曲霉毒素B族和G族的测定】，对辣椒、花椒、香辛料等基质做了黄曲霉毒素检测的方法验证，验证过程如下：

检测方法 ·

第一法（同位素稀释液相色谱-串联质谱法）

实验步骤：

黄曲霉毒素混合标准工作液：AFB₁：AFB₂：AFG₁：AFG₂为1：0.25：1：0.25 ug/mL

黄曲霉毒素混合同位素内标工作液：¹³C₁₇-AFB₁：¹³C₁₇-AFB₂：¹³C₁₇-AFG₁：¹³C₁₇-AFG₂为0.5 ug/mL

称取 5g试样+50uL混合标准工作液+40uL混合同位素内标工作液+84%乙腈 20mL→振荡30min→离心 10min（离心速度 4000r/min）→取上清液过PriboFast^®MFC226固相净化柱→取4mL净化液+46mL吐温PBS稀释→将全部稀释液通过PriboFast^®AFT免疫亲和柱→先用10mLPBS淋洗，再用10mL水淋洗免疫亲和柱→弃去淋洗液，使空气进入柱子，将水挤出柱子→用2mL甲醇洗脱，收集洗脱液于试管中→50℃下氮气吹至近干，用流动相复溶→微孔滤膜（0.22μm）过滤，取滤液上机。

验证结果

	AFB₁（%）	AFB₂（%）	AFG₁（%）	AFG₂（%）
辣椒加标-1	104.0	101.1	96.3	96.0
辣椒加标-2	101.5	97.6	99.7	98.6
花椒加标-1	97.3	95.8	102.6	97.9
花椒加标-2	98.4	99.2	104.1	100.2
卤粉加标-1	102.9	96.8	98.0	95.1
卤粉加标-2	99.6	97.4	96.1	97.8

辣椒样品液质内标和外标谱图：

黄曲霉毒素B₁

黄曲霉毒素B₂

黄曲霉毒素G₁

黄曲霉毒素G₂

第二法（高效液相色谱法）

实验步骤：

黄曲霉毒素混合标准工作液：AFB₁：AFB₂：AFG₁：AFG₂为1：0.25：1：0.25 ug/mL

称取 5g试样+50uL混合标准工作液+84%乙腈 20mL→振荡30min→离心 10min（离心速度 4000r/min）→取上清液过PriboFast^®MFC226固相净化柱→取4mL净化液+46mL吐温PBS稀释→将全部稀释液通过PriboFast^®AFT免疫亲和柱→先用10mLPBS淋洗，再用10mL水淋洗免疫亲和柱→弃去淋洗液，使空气进入柱子，将水挤出柱子→用2mL甲醇洗脱，收集洗脱液于试管中→50℃下氮气吹至近干，用流动相复溶→微孔滤膜（0.22μm）过滤，取滤液上机。

验证结果：

	AFB₁（%）	AFB₂（%）	AFG₁（%）	AFG₂（%）
辣椒加标-1	90.6	91.1	86.3	92.1
辣椒加标-2	93.5	87.6	83.9	88.6
花椒加标-1	92.8	85.0	92.0	87.9
花椒加标-2	95.4	89.2	94.3	90.2
卤粉加标-1	91.0	86.1	88.5	85.1
卤粉加标-2	88.9	87.4	86.0	87.8

卤粉标准品和样品加标液相色谱图：

采购指南

联系热线：400-688-5349

产品编号	产品名称	规格
STD#1081	2ug/mL黄曲霉毒素B₁,G₁、0.5ug/mL黄曲霉毒素B₂,G₂/乙腈	1.2mL/瓶
STD#1082	1ug/mL黄曲霉毒素B₁,G₁、0.3ug/mL黄曲霉毒素B₂,G₂/乙腈	1.2mL/瓶
STD#1084	25ug/mL黄曲霉毒素B₁,G₁,B₂,G₂/乙腈	1.2mL/瓶
STD#1085	100ug/mL黄曲霉毒素B₁,G₁,B₂,G₂/乙腈	1.2mL/瓶
STD#1080U	黄曲霉毒素混合同位素内标（U-【¹³C₁₇】-AFB₁,AFB₂,AFG₁,AFG₂）-0.5ug/mL-乙腈	1.2mL/瓶
M2006	PriboFast^®MFC226固相净化柱	25T
IAC-011-3	黄曲霉毒素总量免疫亲和柱	25T