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参考国标GB/T 23193-2017 HPLC法测定茶叶中的茶氨酸

东曹分离与纯化
2021.4.27
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茶氨酸 (L-Theanine) 是茶叶中特有的游离氨基酸。茶氨酸在化学构造上与脑内活性物质谷酰胺、谷氨酸相似,是茶叶中生津润甜的主要成份。茶氨酸含量因茶的品种、部位而变动,在干茶中占重量的1%-2%。

国家标准GB/T 23193-2017中规定了用高效液相色谱法测定茶叶中茶氨酸含量的方法。

本应用参照上述国标,采用C18柱TSKgel ODS-100V (4.6mmI.D.×25cm, 5μm) 对茶氨酸进行了定量分析,并作标准曲线,其线性关系良好,可满足GB/T 23193-2017中的要求。



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溶液配制



① 色谱流动相配制:水, 100%乙腈

② 标准曲线配制:称取少量L-茶氨酸标准品, 用水溶解并稀释至0.01 mg/mL, 0.02 mg/mL, 0.5 mg/mL, 0.1 mg/mL, 0.15 mg/mL, 0.2 mg/mL。

③ 待测样品配制:称取0.1 g左右茶叶, 加入10 mL水, 100 ℃水浴浸提30 min, 经0.45 μm滤膜过滤后进样。



分析条件



仪器:Thermo Ultimate 3000  

色谱柱:TSKgel ODS-100V (4.6 mm I.D.×25 cm, 5 μm)

流速:0.8 mL/min

柱温:35 ℃

样品盘温度:10 ℃

进样量:20 μL

检测器:UV@210 nm

梯度:

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分析结果



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图1. 茶氨酸的标准曲线


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图2. 茶叶提取液的色谱图

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茶叶实际称重0.1054 g,加水10.6023 g,根据提取液中峰面积数值,计算得提取液中茶氨酸的浓度为0.1212 mg/mL,则茶叶中茶氨酸的含量为1.219%。




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