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细胞存储,你需要知道的几点

天美中国
2021.6.23
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天美仪拓实验室设备(上海)有限公司

Cell storage
细胞存储
你需要知道的几点


Q
1. 细胞存储状态
A

目前气相存储已经成为细胞存储的主流方式。气相存储相比液相存储,减少了样品交叉感染的风险,不会产生冻存管破裂的情况。


在生物样本库中,样品通常以2:1的比例存储于超低温冰箱和气相罐中。所有用于复苏细胞的样品(包括来源于血液、组织的)全部存于液氮中【1】


FDA在2017年的文件中,KYMRIAH细胞疗法注明细胞必须使用气相存储。2020年,再次于abecma的说明书中强调【2】【3】


 UK Biobank 样品存储


Q
2. 细胞存储温度
A

2020年的冷泉港实验手册中,更新了杂交瘤细胞存储的操作步骤,提到长期的细胞存储和高效率的细胞复苏需要存储于-185℃。在此温度下,杂交瘤细胞和骨髓瘤细胞能够常年保有活性【4】



Q


3. 细胞存储的重要性
A

细胞的培养,作为新药研发、抗体生产、疫苗生产等的上游工作,可以说是打好基础的重要步骤。


辛苦构建的细胞系,一旦由于存储时的温度过高、温度不均一导致细胞无法复苏或者活性低下,损失的将是整条研发和生产的线路。




Q
4. 低温液氮存储容器的区别
A

常见的液氮存储容器有四种:

1) 液相存储的铝合金液氮罐- Darwin系列

2) 气相存储的液氮箱- Voyager系列

3) 传统气相存储的气相罐- Origin系列

4) 干式存储的气相罐- Polaris系列


 Darwin系列

液相存储的铝合金液氮罐- Darwin系列

铝合金液氮罐采用液相存储,存储时间长、存储温度低(-196℃),但是有交叉污染、冻存管破裂的风险。


存储样本量:

2000~6000个2ml 冻存管




▲ Voyager系列



气相存储的液氮箱-Voyager系列

液氮箱设计之初是用于大型的液相存储,因此罐口设计的较大,便于存储。


当气相存储成为主流后,液氮箱通过底部加装气相平台和铝制导冷套筒实现气相存储功能。


然而液氮箱顶部温度只能达到-135℃,上下冻存盒的温差可达50℃以上,对于珍贵的细胞样品存储来说并不是一个好的选择。


存储样本量:

3024~38350个2ml 冻存管


 Origin系列

传统气相存储的气相罐-Origin系列

气相罐则一开始就采用了气相存储设计理念,无论是专门的气相托盘还是缩小的罐口直径设计,都为气相罐提供了许多优点。


与液氮箱相比,气相罐的液氮消耗量更低、罐口温度更低(-190℃)、温度均一性好。


存储样本量:

19500~93000个2ml 冻存管


 Polaris系列

干式存储的气相罐-Polaris系列

干式存储的气相罐在传统气相罐的基础上更进一步,采用液氮夹层设计,不仅仅是底部有液氮,存储腔的侧面也有液氮(-190℃),提供了更佳的温度均一性,守护珍贵的样品。


存储样本量:

5200~94500个2ml 冻存管



Q


5. 液氮存储容器的维护成本
A

液氮罐实际使用时,每天的液氮损耗:

    

=罐体静态蒸发量+开盖蒸发量+供给罐传输蒸发量+供给罐静态蒸发量



液氮箱购买时价格低于气相罐,但是由于设计原因,实际存储时,液氮的使用成本远远高于同等体积的气相罐(约5倍)。目前市场上气相罐和液氮箱的购买比例为10:1。对于珍贵的细胞样品来说,干式存储的气相罐是值得信赖的选择。



客户案例


▲ UK Biocentre中的42台Polaris 94


参考资料

  1. The UK Biobank sample handling and storage protocol for the collection, processing and archiving of human blood and urine | Request PDF (researchgate.net)

  2. Clinical Review Memo, March 26, 2021 - ABECMA (fda.gov)

  3. August 30, 2017 Summary Basis for Regulatory Action - KYMRIAH (fda.gov)

  4. Liquid Nitrogen Storage of Hybridoma Cells - PubMed (nih.gov)




END


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