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手把手教你玩转光合仪(之五)--CO2响应曲线测定步骤

北京力高泰科技有限公司
2014.4.30

通过CO2响应曲线能够测得以下重要参数:在饱和光强下,Rubisco酶的最大催化速率(Vc,max),RuBP的最大再生速率(Jmax)和磷酸丙糖的运输速率(VTPU),这三者被认为是限制光合作用的主要因素。

测定前的准备工作:测定CO2响应曲线之前,要进行光诱导。诱导条件:饱和光强下诱导至稳定的光合速率。确定最适CO2浓度和诱导时间,大概30分钟左右。

1、硬件安装与连接:安装红蓝光源;装好化学药品;连接硬件(如果使用CF卡,则插入主机后面固定小槽内)。

2、开机,配置界面选择红蓝光源,连接状态按“Y”,进入主菜单,预热约20分钟。

3、按F4进入测量菜单;进行日常检查。

4、安装CO2钢瓶(O形圈),将苏打管调节旋钮拧到完全Scrub位置,干燥剂管调节旋钮拧到完全Bypass位置。

5、CO2混合器校准。在主菜单下,按f4进入测量菜单,按2,f3,按上下箭头键选择 Reference CO2,按OK,设定参比室CO2浓度为环境CO2浓度(约400μmol mol-1),按enter。将注入系统进行预热1分钟左右。按Esc,退回主菜单。按f3进入Calib Menu,选择CO2 Mixer,回车,按f1拉开内容,选中“calibrate…”,enter, 按Y,系统开始自动校准,当CO2浓度高于2000μmol mol-1,且达到稳定,系统出现“The Max CO2 is about…ppm, Isthis OK?”的提示时,按Y,系统自动进行8点校准,完成后提示“Plot this?(Y/N)”,按Y,观察图像,如果是平滑斜线,则按Esc退出图像,系统会再自动提示“implement this calibrate?”按“Y”,保存,完成CO2注入系统的校准。然后按Esc退出校准菜单。

6、按2,F5(Lamp),按上下箭头键在contrl项选择PAR,在Target项Edit,设定为饱和光强(根据光响应曲线确定),按Keep。

7、打开叶室,夹好叶片,闭合叶室。

8、按5,f1(Auto prog),进入自动测量界面,按上下箭头键选择A-Ci Curve2,enter进入,命名文件,enter,添加remark,enter,出现Summary展开设定Sample CO2,对CO2梯度进行编辑Edit,为400 300 200 100 50 400 400 600 800 1000 1200 1500 1800(注意数值间一定要有空格间隔,上述数值仅供参考),enter后,出现Stability wait 在最小等待时间Minimum wait time (secs)下

9、按1,F3(Close file)保存文件。

10、更换叶片,重复6 ~ 10步骤。

11、导出数据。数据卡的数据请用读卡器导出,机器中的数据有两种方式导出:一种是通过RS232数据线导出,另一种为网线方式导出:取出数据卡,插入网络适配器,连接网线到电脑,在电脑上预先安装LI-6400XTerm软件,双击打开图标后,选择以太网连接机器,打开Windows下的File,右面窗口选择User下的数据,左面窗口选择计算机的存储位置。拖动右面窗口数据到指定位置即可!

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