随着分子技术的进步,人们创造转基因“发光”生物的速度急剧增加,可以在短短几周内实现从理论到实验。这也给研究人员带来了一个挑战——如何快速筛选大量荧光样本?一般来说,现在有两种选择,即借助于成像仪或显微镜。
具有荧光功能的成像仪已成为筛选荧光样本的首选工具之一,原因如下:
1) 荧光成像仪即插即用,与显微镜相比,只需很少的调整即可捕获图像;
2) 荧光成像仪的分辨率足以满足筛选目的,与显微镜并行使用时可以节省时间;
3) 荧光成像仪通常比荧光显微镜便宜,操作技能简单门槛较低;
4) 成像仪占用实验室的空间更小;
接下来我们一起看看Analytik Jena GelStudio在植物组织活体成像中的具体应用。A. Montoya和S. Porter在温哥华华盛顿州立大学,利用根瘤菌感染植物根系形成根瘤,通过Analytik Jena GelStudio 成像仪进行荧光筛选。
一、实验背景介绍
华盛顿州立大学Angeliqua Montoya博士基于GelStudio多色荧光功能进行根瘤菌与植物协同进化方向的研究,该课题组的科研人员构建表达绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白的根瘤菌,将其引种到牛膝草中。根瘤形成后,在GelStudio成像仪上对植物的根进行荧光筛选。利用热图,可以一目了然地判定样品中单阳性、双阳性或无荧光根瘤菌的分布。这个筛选方法可以快速高效的检测大量样本,有助于识别数据的趋势,研究根瘤菌与宿主的协同进化。
二、结果分析
使用 Analytik Jena VisionWorks 软件得到如下结果:
图1: 使用Analytik Jena VisionWorks软件合成的根瘤荧光图像(仅为三个有代表性的样品图像)。
图2. 表示sfGFP和mScarlet荧光的非零对数变换平均密度荧光信号(左);柱状图表示根瘤在无荧光、mScarlet+、sfGFP+和mScarlet+/sfGFP+ 四种模式中的分布情况(右)。
三、总结
Analytik Jena成像仪还有很多的功能,除能够进行基于体内荧光的筛选之外,还能应用于凝胶成像、免疫印迹、菌落计数、动物活体成像等。敬请期待更多成像应用案例分享。