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为您解答
哈喽，各位小伙伴！关于前段时间依利特进行的直播活动《液相色谱填料的分类和应用》，首先非常感谢大家的参与，当时在直播间也是提出了很多有价值的问题，我们进行了汇总，并一一进行了解答。
问
色谱柱的寿命问题
答
色谱柱是耗材，都是有一定的使用寿命，一般的色谱柱不建议使用太高的温度，对硅胶柱，建议低于60度使用，若分析温度较高，尽量选择耐高温色谱柱；另外注意流速的调整要逐步变化，pH不要太高，从而提高色谱柱的使用寿命。
问
跟Waters BEH色谱柱的差别？
答
跟Waters BEH相比，选择性一致，可以完全替代。并且这款色谱柱填料基质有机物含量更高，pH范围更宽，性价比高。
问
对于比重组蛋白分子更大也相对复杂的的分子如质粒DNA ，mRNA,病毒颗粒等有哪些适用的分析柱或填料呢？
答
生物大分子，DNA、mRNA等，可以采用大孔填料或薄壳填料。
问
我们常年用依利特的Supersil NH2 这款柱子，正相柱反相使用，但保留时间会随着使用时间越来越提前，可否避免？特别是这种氨基柱，正相反用的特别严重
答
氨基柱在反相条件下容易键合相流失，寿命低。流动相中水的比例不要太大，pH尽可能中性。纯有机相保存，如乙腈。不要正反相来回切换，来回切换很影响色谱柱的寿命，请尽量专柱专用。
问
两个不同品牌的c18的色谱柱，对一个供试品中的两个杂质会出现出峰顺序不一致的情况吗？
答
会的，虽然同是C18色谱柱，但是因为键合相的密度，比表面积、基质的制作工艺，键合过程等诸多因素可能有差别，从而导致色谱柱的选择性出现差异，不同的C18色谱柱，两个杂质峰的出峰顺序出现不一致也是可能的情况。
问
对于购买到货液相柱子如何确认极性，是碳18?
答
色谱柱的极性主要是和基质上的键合相有关，C18的键合相相对极性是很弱的，氨基、氰基柱的键合相极性是比较强的，所以要确定色谱柱的极性，就看看您买的是哪种键合相的色谱柱。
问
为啥常规的硅胶色谱柱，pH值的适用范围是2-8？
答
因为pH比较高时，大于8的情况下，硅胶会出现溶解的情况，导致色谱柱寿命降低；在酸性比较强的时候，pH小于2时，硅胶上的键合相会出现溶解的情况，也导致了色谱柱容易损坏，所以，一般的硅胶，建议使用的范围是2-8。
问
老师，草酸的检测适合用哪类色谱柱？
答
草酸是小分子酸，可以用我们的小分子醇酸的专用柱，也可以用极性比较大的色谱柱试一试。
问
为什么常规的C18色谱柱分析碱性化合物会出现拖尾现象？
答
C18链比较长，键合时，空间位阻比较大，从而导致大量的硅羟基残留，残留的硅羟基在酸性或中性条件下容易解离，并带上负电荷；而碱性化合物在酸性或中性条件下，也存在解离现象，会已带正电荷的离子存在。解离的硅羟基和解离后的碱性化合物产生二级作用，从而导致碱性化合物出现拖尾现象。
问
老师，您好，都是C18色谱柱，为什么分离度和选择性有那么大差别呢？
答
虽然键合相一样，都是C18色谱柱，然而，不同品牌的C18色谱柱，填料基质的颗粒类型、填料的孔径、比表面积、键合相的密度以及键合技术等都有所不同，所以在分离度和选择性方面会有较大的差别。
问
请问如果依利特普通碳18ods柱子可以分离，但是没有加有机相损伤柱子。如果换成咱们的aq柱，分离时间和分离效果能同比ods柱吗？
答
这要看一下这个普通的C18色谱柱和AQ-C18色谱柱一些参数的差异，比方孔径、比表面积、碳载量等等，若是基本一致的话，理论上保留时间和分离效果差不太多，但是实际情况还得以实验为准。
问
氨基柱压力升高，出锋时间提前，提前到一定程度出锋时间就稳定了，这个是什么原因？
答
这可能性可能为：1）系统平衡时间不够，没有达到稳定，从而出现保留提前的问题；2）有可能是氨基柱上吸附了一定的杂质，从而使电荷的吸附和置换变得缓慢，这样也会出现您前面说的现象。
问
头孢类检测聚合物药典是G—10填料色谱柱，常遇到的问题是柱寿命短，请问有好的推荐吗？
答
这个寿命短主要可能原因有两种：1）色谱柱装填的柱床不太稳定，但是一般大品牌的色谱柱不会出现这种情况；2）色谱柱的使用和维护方面可能做的不是太好，尤其是使用缓冲盐后，一定要及时用纯水冲洗干净，否则也会容易产生色谱柱寿命短的情况。
问
老师，您好，核酸分子检测最好选用什么的buffer，梯度怎么设置最好
答
不同的核酸分子，分析条件应该会不同，我公司提供选柱服务，您可以把样品邮寄到我公司，我们可以帮您选柱。
问
今天我用一根新色谱柱做分析，是waters的常规柱，0.1的流速压力都高的吓人，peek头直接崩掉了，换一台仪器再试还是如此，把柱子倒过来也还是压力高的不行，老师，是不是这个柱子只能报废啦？
答
这种情况有可能是色谱柱堵了，请查一下色谱柱的保存溶剂和您使用的流动相是不是互溶，是不是因为流动相不兼容引起的。若是的话，可以用异丙醇过度一下试试。
问
C18柱子用一段时间后压力变大，是不是就是柱效降低，不能用了？能修复吗？
答
C18色谱柱用一段时间后，存在压力变大的情况，可能的原因是色谱填料上有其他的杂质吸附。若是该色谱柱的柱效不能满足您的要求，可以对色谱柱进行再生，再生的方法，每个公司的色谱柱有差别，请和色谱柱的厂家联系，咨询他们色谱柱的再生方法。
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