论文解析 | BeaverBeads® Streptavidin应用于研究肝X受体在胸腺细胞发育中的作用

2020年，第三军医大学基础医学院周新元教授团队在Cellular & Molecular Immunology上发表文章《Liver X receptor β is required for the survival of single-positive thymocytes by regulating IL-7Rα expression》 表明肝X受体β型通过调节IL-7Rα的表达对单阳性胸腺细胞的存活起重要作用。

为验证这一猜想，研究者检测了在LXRα缺失，LXRβ缺失和野生型小鼠中初始T细胞的数量和频率。为了避免LXRβ被敲除后胸腺微观环境改变可能导致的影响，研究者使用 LSK (Lin^–Sca-1⁺c-Kit⁺)细胞混合物生产了辐照变异的骨髓嵌合体小鼠。其中敲除LXRβ和野生型小鼠的数量比为1：1。为了制作骨髓嵌合体，共2000个无LXRβ 的 LSK（Lin^–Sca-1⁺c-Kit⁺)细胞分别用含有LXRβ、IL-7Rα、Bcl2或空编码序列的逆转录病毒转染到致命性辐射受体小鼠中，12周重组之后进行分析。

其中，Lin^-细胞的富集是通过磁珠分选的方法。通过链霉亲和素和生物素的相互作用，将生物素化的Lin+标记物固定在BeaverBeads^®  Strepavidin 链霉亲和素磁珠上，利用磁珠去除Lin⁺细胞。

研究结果显示，缺失了LXRβ的胸腺细胞分布明显减少了。这种减少包括CD4单阳性和TCRβ+CD8单阳性。同时，双阴性，未成熟单阳性和双阳性胸腺细胞数与野生型小鼠的比没有明显变化。另外，缺失了LXRβ的鼠源CD4+ 和CD8+ T脾细胞数量也有非常明显的下降。这些数据显示肝X受体β型对单阳性胸腺细胞的存活起重要作用。