分析经验分享
当液相鉴别中供试品与对照品出峰时间不一致，无法判断是否合格时，可用对照品与供试品各半配成混合溶液后进样，若峰宽未变宽，未出现驼峰，即可判断为合格
做原料残留物检测的时候，如果主药对杂质有干扰，现有方法无法检出，需要自己建方法的话，要优先考虑利用理化性质将杂质分离出来再进行测定。往往有意想不到的效果。
做药品有机溶剂残留量检查时,可以不拘泥于规定的色谱柱, 通常的DB-624可以满足要求, 取样量也可以灵活调整, 标准溶液浓度根据限度做相应调整就可以了。
在采用HPLC法测物质含量时，如若流动相中用了缓冲盐，一定要注意其pH值，放置过程中可能会产生变化，而某些药物对这种变化很敏感。
用HPLC法测物质含量时，温度的控制极其重要，最好用有柱温箱的，如果没有就要装空调保持恒温后再测定，否则会出现基线飘移，结果不准确。
用HPLC法测物质含量时，样品最好用流动相溶解，否则容易产生干扰峰，影响结果，特别有可能出现倒峰，一定要注意。
HPLC检测中，梯度条件容易产生干扰峰，可尝试通过以下几种方法规避：
① 使用重蒸后的水或用市售的纯净水（乐百氏的比较好）
② 尽量选用高波长下检测
③ 梯度程序尽量平缓
④ 样品浓度选用线性范围内的最高点
在做片剂或胶囊剂的溶出度实验时，规定药液需经0.8Uｍ的滤膜滤过，但采用液相检测时，进柱前样品还要经0.45Uｍ的滤膜，此时，可以省略第一步过滤，直接做进柱前的样品过滤，否则滤膜会对样品产生吸附，使检测结果偏低, 另外不同生产厂家的滤膜对样品的吸附不同，在检测时一定要要注意，可用对照品先做一个过滤前后的对比试验，检查滤膜的吸附。
在做有机溶剂残留市要注意载气流速一般柱流速在1-3ml较好，太大样品重复性不好，尾吹气流量也需注意。
使用HPLC的过滤装置时 ，一定要注意虑膜的材质，如果是“羟甲基纤维素”不可以过滤含有机相的液体，否则就溶解了，有机相过滤要使用聚四氟乙烯的
当做高效液相测定肽类时，使用梯度条件情况下，在做第一针样品前，最好走一个空梯度，这样保留时间会一致些。
在用HPLC做定量检测时,柱温和流动相的比例要尽量保持一致,否则,保留时间和积分面积会发生变化,影响最终的检测结果
在做HPLC时，假如发生重叠峰的现象，通常可以尝试以下几种方法：
1、改变流动相成分，如乙腈相改为甲醇相；
2、调整流动相比例；
3、调整流动相PH值；
4、梯度洗脱；
5、其他。
进行HPLC检测使用磷酸盐缓冲液：
乙腈做缓冲液时时，当缓冲液比例小于50％时，由于混合过程是吸热反应，在该过程中磷酸盐会析出晶体，造成流动相混浊而报废。如强行使用会阻塞色谱管道，对于这种情况，可以有以下两种处理方法：
1）配制50：50的溶剂，然后10％加入，超声至高于室温，在加入10％，再超声高于室温，直至到达所需比例。
2）配制不带盐的流动相，再超声至高于室温后，加入固体盐，超声至溶解，再过滤。
做液相有关物质分析时，有时不知道样品峰里是杂质峰还是溶剂峰。可以做个小实验，加大溶剂里面不同溶剂组分的比例再分别进样，这样可以在色谱峰中看到溶剂峰有明显增高的现象。（当然是说某些品种或某些试剂才会这样体现的）。我做过注射用甘草酸单铵S，因为工艺过程是用氨水调的PH值，那段时间不能确定有个峰不知道是不是杂质，最后我把氨水拿来进样才确定了是工艺过程氨水成分影响的
在使用微量移液枪时,要注意"重压轻打",加液会更家准确
使用含有缓冲盐的流动相，容易堵塞管路和柱子，甚至检测器，如果检测器堵了，最好先不要拆，使用10%甲醇水超声加热一下作为流动相，慢慢小流量冲洗。效果很明显。
在用HPLC分析时，如果流动相没有缓冲盐而且连续几天都做相同这个品种时，可以把柱子保存在冰箱中第二天继续用，可以省了冲洗柱子的时间和对柱子的平衡时间
用高效液相色谱仪检测人参、麻黄的含量时因检测波长为边缘波长（203、207nm）往往一次不能成功，特别是使用一段时间后的检测器。可卸掉色谱柱，直接连接检测器，用0.1%的盐酸清洗检测池4小时，效果会好些。
用高效液相色谱仪测定含量时，用色谱纯试剂处理对照品和样品，可减少误差
液相如有多个单向阀的仪器在使用乙腈有时候会引起单向阀粘连,泵压会不稳,这时候用甲醇或异丙醇冲一段时间,或把单向阀拆下超声清洗下。
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