分析测试百科网

搜索

分析测试百科网 > 行业资讯 > 微信文章

如何使用 BioTek 酶标仪,实现高通量微量样本吸收光检测?

安捷伦细胞分析
2022.6.07


a03e7e4371e7376026b92226fcd918ca.jpg

核酸和蛋白样品太多,如何做批量检测呢?不要着急,BioTek Take 3 板就能实现高通量微量样品检测,快来跟小编学习新技能吧。


仪器及配件

仪器:BioTek 全光谱酶标仪。

配件:Take 3 板(可进行 16 个样品检测)或者 Take 3 Trio 板(可进行 48 个样品检测)。


操作流程

以检测 dsDNA 为例进行操作流程介绍,具体如下:

1

软件中增加 A260/A230 数值

软件默认检测 260nm 和 280nm 处吸光值,自动计算 A260/A280 纯度比,若想查看 A260/A230 纯度比值,需要在软件上进行设置。


注:对于纯的 dsDNA,A260/280 比值应该在 1.8-2.0,A260/230 比值 ≥2.0 。A260/230 比值偏低指征样品中可能有苯酚、胍、碳水化合物等残留。


打开软件,在菜单栏点击“Take3”,选择“Nucleic Acid Sample Types”

7ca3e551a489f01bc1f309fe2c0b756f.png


弹出下方对话框,点击“New”

8579dd5fc81b30e37c2946bc5e292830.png


按照下图参数进行设置,勾选“Sencondary Ratio Wavelength”,默认波长为 230nm,设置完成后,检测样品时会自动采集 260nm、280nm 和230nm 处的吸光值,并在结果中自动显示 A260/A280 和 A260/230 比值。


注:对于 dsDNA Extinction Coefficient 数值为 50 ,ssDNA 为 33 ,RNA 为 40 。

30f17cfdd3199b874f522c485ae555c3.png


2

在 Take 3 或者 Take 3 Trio 上加样品

以 Take 3 为例介绍

1995dfde43be042c26c7b64a5a9cc357.png

Take 3 可检测 16 个样品,可使用排枪进行加样,每个样品点处加 2ul 样品,不要有气泡。最少设置两个孔为 Blank ,进行背景扣除。完成后轻轻盖上,防止液体飞溅。


注:使用溶解 dsDNA 的 buffer 作为 Blank :如使用 TE buffer 溶解,则使用 TE buffer 做 Blank 。

ea023b4ed707ccf4c6d136a13a0563d0.png


3

开始检测

将 Take3 板放置于 BioTek 载板台上,Take 3 A1 位置与仪器载板台 A1 位置对齐。


打开 Gen5 软件,在 Task Manager 中“Read Now”处选择“Nucleic Acid Quantification”进入核酸检测界面。

c5bd6c620a8c8ade0ce1cdfd54ea0748.png

Sample type 选择 dsDNA+A230 。


在 Well Type 中选择“Blank”,最少设置两个孔为 Blank 孔。软件会以 Blank 孔的平均值进行背景扣除。若 Blank 孔的 CV% 超过 10% ,软件将进行提醒,且不进行样品检测,直至 Blank 孔 CV% 在 10% 以内。在 Well Type 中选择“Sample”,进行检测样品的设置,若有重复,可在 Repication 处进行设置。

d30721ff77ca78f953c91587a346c9ac.png

设置完成后,点击 Read 和 OK 。仪器进行 Blank 孔吸光度检测,完成后点击 Approve ,Blank 孔 OD260 原始数值将导出到 Excel 中。


注:检测完成后,结果将自动导出到 Excel 中,因此,电脑上要装上 Office 哦。


点击 Read,进行核酸样品检测,完成后点击 OK ,数据导出到 Excel 中。完成所有样品检测后,点击“End of Batch”,导出批量汇总结果。


完成实验后可点击 File-Save 保存实验。


取出 Take 3 板子,用无尘纸将板子和盖子上液体擦拭干净即可。



9e6ef71881e72e76efd1d2408cc9916e.gif


关于BioTek

BioTek是世界领先的多功能微孔板检测仪及软件的研发生产公司,拥有54年的悠久历史。BioTek的Synergy系列多功能微孔板检测仪拥有灵活的功能配置和优异的检测结果,配合友好强大的操作软件,为广大用户提供了便捷高效的使用体验。服务科学,促进科学始终是我们追求的目标。2019年BioTek加入安捷伦科技有限公司,成为细胞分析事业部的重要组成成员。


关于安捷伦

安捷伦科技有限公司(纽约证交所:A)是生命科学、诊断和应用化学市场领域的全球领导者,致力于为提高生活质量提供敏锐洞察和创新经验。安捷伦的仪器、软件、服务、解决方案和专家能够为客户最具挑战性的难题提供更可靠的答案。2020财年,安捷伦的营业收入为53.4亿美元,全球员工数为16,400人。


fd88693cd7b2d5f1ca70e1674878fe1b.jpeg

长按识别二维码,关注安捷伦细胞分析

发布需求
作者
头像
仪器推荐
文章推荐