古有神农尝百草，今有类器官试药
结直肠癌（CRC：Colorectal Cancer）为全球范围内排名第三位最常见的癌症。2020年，近乎200万人确诊，它也是第二大引起死亡的癌症杀手。--来自WHO
患者衍生类器官（PDO: Patient-derived organoids）模型在药物筛选中有巨大应用价值。2022年题为Functional patient-derived organoid screenings identify MCLA-158 as a therapeutic EGFR × LGR5 bispecific antibody with efficacy in epithelial tumors的文章发表于Nature Cancer（IF：21.94）期刊，由类器官之父Hans Clever等来自企业和高校39位科学家共同完成。
研究者利用结直肠癌PDO，对超过500种双特异性抗体进行药物筛选，最终发现MCLA-158（EGFR x LGR5双特异性抗体）可与表皮生长因子受体（EGFR）和富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体-5（LGR5）相结合，有效抑制结直肠癌类器官生长和转移。
PDO比2D细胞培养更能模拟肿瘤，可更好地再现原发肿瘤异质性和空间组织。携带KRAS激活突变的很大一部分CRC仍然显示出对EGF的依赖，而在标准培养条件下扩增的细胞系却未能显示出这一特征。另外，可使用同一患者健康和癌变PDO，共同应用于早期候选药物筛选，排除对健康组织产生不利影响的药物。
然而，所有的研究模型，无论是细胞培养、人源化组织异种移植小鼠（PDX：Patient-derived xenografts）还是PDO，在面对复杂的病理生理条件下，都有各自局限，甚至可能产生互相矛盾的结果。例如，具有KRAS突变的皮下PDX模型对MCLA-158的敏感性低于KRAS突变的PDO模型。因此，治疗性药物发现面临诸多挑战。早在2016年，美国国家癌症研究所（NCI）就曾宣布，已被全世界研究人员所使用长达25年之久的NCI-60细胞系将退出历史舞台，取而代之的是来自癌症患者且经小鼠体内培养的新肿瘤样本，即PDX模型。不可否认，PDO的热度与关注度与日俱增，对比PDX模型的周期长、低通量、高成本，PDO可身先士卒，与PDX等模型一起为药物筛选共同赋能。
研究人员利用全自动Digital Western检测
本文中，研究人员利用毛细管全自动Digital Western检测 P18T（KRAS野生型）、C55T（KRAS突变型）和C82N（非病变类器官）样本中，使用MCLA-158和西妥昔单抗（Cetuximab）培养（0小时、1小时、6小时、72小时）后，EGFR蛋白表达情况。西妥昔单抗是靶向EGFR的单克隆抗体药物，用于治疗结直肠癌转移患者。然而，存在诸多局限。目前抗-EGFR药物对RAS肿瘤家族（主要为KRAS）激活突变的CRC患者无效；并且，在RAS野生型患者中，仅对一部分人有效，并伴随治疗限制性不良反应。因此，在本实验中作为与MCLA-158的对照。
Q
类器官研究，为何需要全自动Digital Western？
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