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高效汞探针,健康关键“帧”

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2022.10.09

众所周知,汞是一种剧毒物质,它会导致前脑损伤、认知和运动障碍、视力和听力损伤甚至死亡。长时间暴露于含汞的环境中,其金属化合物很容易在生物膜中扩散,增加其毒性。有研究表明,有机碲化合物具有更强的谷胱甘肽过氧化物酶催化活性,可以大大提高化合物的抗氧化性能,由于汞对碲具有更高的亲和性,因此可以开发含有有机碲的BOPHY探针,用于Hg2+的高选择性、高灵敏度检测。

2022年6月9日,印度孟买大学的Sudesh T. Manjare教授课题组在Dalton Transactions杂志上发表题目为“A BOPHY based fluorescent probe for Hg2+via NTe2 chelation”的研究论文。研究人员合成了一种含碲的探针3,为检测Hg2+提供了一种高灵敏度、高选择性的方法。

将化合物1(合成方法见图1)与化合物2(合成方法见图2)的混合物在氮气下回流24h合成探针3,用DCM提取得到粗产物,粗产物经硅胶柱层析得到红色固体探针3。研究人员采用荧光光谱法对探针3与Hg2+、Hg+、Cu2+、Cu+、Ca2+、Na+、Co2+、K+、Zn2+、Al3+、Fe2+、Cd2+、Mn2+、Ag+、Fe3+和Pb2+等多种离子进行筛选,结果发现探针3与Hg2+反应,并在547nm处形成高强度发射带(图3),而探针3 与其他金属离子并没有表现出荧光强度的增强。后续实验证明探针3不受pH的影响,且具有良好的光稳定性(图4)。

图1 化合物1合成方式

图2 化合物2合成方式

图3 探针3 (20μM)与金属离子(Hg2+、Hg+、Cu2+、Cu+、Ca2+、Na+、Co2+、K+、Zn2+、Al3+、Fe2+、Cd2+、Mn2+、Ag+、Fe3+和Pb2+)的荧光光谱

图4  探针3 (20μM) 随时间变化的发射光谱

(溶液中含有6等量的Hg2+)

为研究探针3在活细胞中检测Hg2+的传感能力,利用Agilent BioTek Cytation 5成像系统进行成像分析。在100µM的探针3溶液中孵育人宫颈癌(HeLa)细胞1h,细胞显示弱荧光(图5a),经过Hg2+处理的HeLa细胞没有显示任何荧光信号(图5b),而细胞在Hg2+中孵育1h后,再用探针3孵育1h,会显示出强烈的绿色荧光(图5c),因此说明探针3具有检测活细胞中Hg2+的能力。

图5 探针3在HeLa细胞中的荧光图像

(左)DIC图像;(中)GFP图像;(右)合并图像。用(a)探针(100µM)孵育1h;(b)Hg2+(50µM);(c)Hg2+(50µM)接探针3(100µM)1h。

结论

该研究开发了一种用于选择性检测Hg2+的新型的含有机碲的荧光探针3。作者在547nm处瞬间观察到探针3对Hg2+的荧光反应,然而对其他所检测金属离子并无荧光反应, 并且该探针在生理pH范围内检测能力良好。通过Agilent BioTek Cytation 5成像系统证实探针3在活HeLa细胞中具有Hg2+的检测功能。综上,探针3可以高灵敏度、高选择性地检测Hg2+。

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